技術的留意事項：分娩前の乳牛の尿アンモニウム濃度測定のための比色測定ポイントオブケア試験の評価

Technical note: Evaluation of a colorimetric point-of-care test for measuring urine ammonium concentration in periparturient dairy cattle.

• A A Megahed
• P D Constable

抄録

尿アンモニウム濃度（[NH]）は、尿 pH が 6.1 未満の乳牛の栄養摂取による全身性酸性化の大きさを示す臨床的に有用な指標となる。本研究の目的は、酸性化飼料を消費する乳牛の尿[NH]の測定における低コストのポイントオブケア比色試験の分析性能を評価することであった。43 頭のホルスタイン-フリーズリアン牛から採取した 154 尿検体を用いて方法比較試験を実施した。インドフェノールブルー比色法（MColortest、Merck KGaA、Billerica、MA、試験法）で測定した尿[NH]とホルムアルデヒド滴定法（基準法）で測定した尿[NH]を比較した。診断性能は、ピアソン相関係数（r）、Passing-Bablok回帰、Bland-Altmanプロット、および2値ロジスティック回帰を用いて評価した。比色法で測定した尿[NH]はホルムアルデヒド滴定法で測定した尿[NH]と強い相関があった（r = 0.98；P < 0.0001）。方法の比較研究では、比色試験は尿[NH]<80 mmol/Lのときに許容可能な試験性能を提供することが示された。ロジスティック回帰分析は、比色アンモニウム試験の受信機動作特性曲線の下の面積は、ホルムアルデヒド滴定[NH]> 10 mmol/L、尿pH <6.1に相当するを識別するために使用されたときに0.985で高かったことを示した。比色試験の最適カットポイント([NH]> 11 mmol/L)では、感度=0.94、特異度=0.97、陽性尤度比=27.6、κ=0.89となり、優れた試験性能を示した。我々は、インドフェノールブルー比色法は、酸性飼料を消費する乳牛からの希釈尿サンプル中の尿[NH]を測定するための正確で低コストの実用的なオンファーム試験を提供したと結論付けた。

Urine ammonium concentration ([NH]) provides a clinically useful indicator of the magnitude of nutritionally induced systemic acidification in dairy cattle when urine pH < 6.1. The objective of this study was to evaluate the analytical performance of a low-cost point-of-care colorimetric test in measuring urine [NH] in dairy cattle consuming an acidogenic ration. A method comparison study was performed using 154 urine samples from 43 periparturient Holstein-Friesian cows. We compared urine [NH] measured by an indophenol blue colorimetric test (MColortest, Merck KGaA, Billerica, MA; test method) with levels measured by formaldehyde titration (reference method). Diagnostic performance was evaluated using Pearson correlation coefficient (r), Passing-Bablok regression, Bland-Altman plot, and binary logistic regression. Urine [NH] measured by the colorimetric test was strongly correlated (r = 0.98; P < 0.0001) with urine [NH] measured by formaldehyde titration. Method comparison studies indicated that the colorimetric test provided acceptable test performance when urine [NH] < 80 mmol/L. Logistic regression analysis indicated that the area under the receiver operating characteristic curve for the colorimetric ammonium test was high at 0.985 when used to identify formaldehyde titration [NH] > 10 mmol/L, equivalent to urine pH <6.1. At the optimal cut point ([NH] > 11 mmol/L) for the colorimetric test, sensitivity = 0.94, specificity = 0.97, positive likelihood ratio = 27.6, and κ = 0.89, indicating excellent test performance. We conclude that the indophenol blue colorimetric test provided an accurate, low-cost, and practical on-farm test for measuring urine [NH] in diluted urine samples from dairy cattle consuming an acidogenic ration.

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