多形核好中球のマイコバクテリア感染症におけるPPE25の役割

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Sichuan Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban.2018 Nov;49(6):871-875.

多形核好中球のマイコバクテリア感染症におけるPPE25の役割

[The Role of PPE25 in Mycobacterial Infections of Polymorphonuclear Neutrophils].

You-Jun Mi
Li-Juan Liang
Cai-Hong Ci
Yue-Ying Wang

PMID: 32677395

抄録

目的:

多形核好中球（PMN）における（MS）感染におけるPPE25の役割を明らかにする。

OBJECTIVE: To determine the role of PPE25 in the infection of (MS) in polymorphonuclear neutrophils (PMNs).

方法:

MS-pe25群では、PMNに感染した非病原性早生（Mtb）でPPE25が発現していた。空ベクターMS（MS-vec群）を対照とした。それらのコロニー形成を、単一コロニーの大きさおよび成長曲線を含めて観察した。コロニー形成単位（CFU）は細菌の活力を示した。乳酸脱水素酵素（LDH）遊離率はPMNの死を測定した。フローサイトメトリーで検出された活性酸素種（ROS）、硝酸還元酵素で検出された一酸化窒素（NO）レベル、ELISAで検出されたサイトカインインターロイキン（IL）および腫瘍壊死因子α（TNF-α）によって、MS感染におけるPPE25タンパク質の役割を分析した。

METHODS: In MS-ppe25 group, PPE25 was expressed in non-pathogenic fast-growing (Mtb) that infected PMNs. The empty vector MS (MS-vec group) was served as control. Their colony formation was observed, including the size and growth curves of single colonies. The colony forming unit (CFU) indicated bacterial vitality. The percentage of lactate dehydrogenase (LDH) release measured PMN death. The role of PPE25 protein in MS infections was analyzed by reactive oxygen species (ROS) detected by flow cytometry, nitric oxide (NO) level detected by nitrate reductase, cytokine interleukin (IL) and tumor necrosis factor-α (TNF-α) detected by ELISA.

結果:

PPE25タンパク質は、MSの増殖、コロニー形成、および単一コロニーのサイズに影響を与えなかった。MS感染したPMNは、MS-vec群と比較して、感染後2、6、12時間後のCFUおよびLDH放出率が高かった（<0.05）。また、MS感染PMNでは、感染2時間後のROSとNOのレベルが低く（<0.01）、TNF-αのレベルが一貫して高く（<0.01）、6時間後のIL-1β注入のレベルが高く（<0.01）、MS感染後2時間後のROSとNOのレベルが低かった。

RESULTS: PPE25 protein had no effect on MS growth, colony formation and the size of single colonies. MS-infected PMN had higher percentages of CFU and LDH release 2, 6, and 12 h after infections compared with the MS-vec group (<0.05). MS-infected PMN also had lower levels of ROS and NO levels 2 h after infections (<0.01), consistently higher levels of TNF-α (<0.01), and higher levels of IL-1β infusion 6 h after MS infections (<0.01).

結論:

PPE25タンパク質はPMNにおけるMSの生存率を高め、細胞壊死を誘導し、活性酸素やNOの発現を抑制し、サイトカインの分泌を変化させ、宿主免疫を回避して病原体の拡散を助ける。

CONCLUSIONS: PPE25 protein increases the survival of MS in PMN, induces cell necrosis, inhibits the expressions of ROS and NO, and changes the secretion of cytokines, which helps spread of the pathogen by evading host immunity.