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ホスホモリブデン酸は、ピクロシリウスレッドによる非特異的な核染色を防ぐが、ブルーライトによってモリブデンブルーに変換される
Phosphomolybdic Acid Prevents Nonspecific Nuclear Staining by Picrosirius Red but Is Converted to Molybdenum Blue by Blue Light.
PMID: 32674674 DOI: 10.1369/0022155420942620.
抄録
ピクロシリウスレッド（PSR）染色は一般的に肝線維化の評価に用いられているが、PSRは時に非特異的な核染色を引き起こすことがある。本研究では、PSRによる非特異的核染色を防止するためのホスホモリブデン酸（PMA）前処理の能力を評価した。肝細胞癌患者の非腫瘍検体27例を対象とした手動評価では、非特異的核染色がPMA処理した検体の3.7％で観察されたのに対し、未処理の検体では85.2％であった。逆に、コンピュータ支援画像解析（CAIA）では、非特異的核染色がPMA処理標本の0％（未処理標本の44.4％）で確認された。驚くべきことに、マウント後、PMA処理した試料は、太陽光曝露または仮想スライドスキャン後のモリブデンブルー（MB）の生成のために青みを帯びていた。UVカットフィルムを用いることで，太陽光照射によるMB生成は抑制されたが，仮想スライド走査時のMB生成は抑制されなかった。さらに、青色発光ダイオード照射のみでは、PMA溶液中に青味を帯びる結果となった。これらのデータから、PMAの前処理はCAIAを用いた肝線維化の評価に有効であることが示唆された。一方、バーチャルスライドスキャンのプロトコルを改善することで、CAIAを用いたPMA前処理標本の品質を直接向上させることができると考えられる。
Picrosirius red (PSR) staining is generally used to evaluate liver fibrosis; however, PSR sometimes causes nonspecific nuclear staining. In this study, we evaluated the ability of phosphomolybdic acid (PMA) pretreatment to prevent nonspecific nuclear staining by PSR. In a manual evaluation of 27 non-tumor samples from patients with hepatocellular carcinoma, nonspecific nuclear staining was observed in 3.7% of PMA-treated specimens, compared with 85.2% of untreated specimens. Conversely, computer-assisted image analysis (CAIA) identified nonspecific nuclear staining in 0% of PMA-treated samples, vs 44.4% of untreated samples. Surprisingly, after mounting, PMA-treated specimens exhibited a blue tinge because of molybdenum blue (MB) production following sunlight exposure or virtual slide scanning. Using UV cut film, MB production induced by sunlight exposure was prevented; however, the film did not prevent MB production during virtual slide scanning. Moreover, only blue light-emitting diode exposure resulted in a blue tinge in PMA solution. Our data indicated that PMA pretreatment is effective for evaluating liver fibrosis using CAIA. Meanwhile, improvements in virtual slide scanning protocols would directly improve the quality of PMA-pretreated specimens subjected to CAIA.