可溶性CD14はToll-like Receptor 4を介して関節リウマチ線維芽細胞様滑膜細胞に炎症性サイトカインを誘導する

Soluble CD14 Induces Pro-inflammatory Cytokines in Rheumatoid Arthritis Fibroblast-Like Synovial Cells via Toll-Like Receptor 4.

• Yoshihide Ichise
• Jun Saegusa
• Shino Tanaka-Natsui
• Ikuko Naka
• Shinya Hayashi
• Ryosuke Kuroda
• Akio Morinobu

抄録

目的:

関節リウマチ（RA）患者の滑膜液には高濃度の可溶性CD14（sCD14）が多く含まれている。我々は、関節リウマチの発症におけるsCD14の役割を調べるために、関節リウマチ患者の線維芽細胞様滑膜細胞（RA-FLS）にsCD14が結合してシグナルを伝達するかどうかを調べた。

OBJECTIVES: Synovial fluids of rheumatoid arthritis (RA) patients commonly contain high concentrations of soluble CD14 (sCD14). To investigate its potential role in RA pathogenesis, we tested whether sCD14 binding transmits a signal to fibroblast-like synoviocytes from RA patients (RA-FLS).

方法:

RA-FLS の sCD14 刺激による炎症性サイトカイン、ケモカイン、メディエーターの誘導をリアルタイム PCR および ELISA により定量した。細胞増殖はBrdUアッセイにより評価した。Toll様受容体4（TLR-4）アンタゴニストであるLPS-RSはTLR-4シグナル伝達を遮断するために使用された。

METHODS: The induction of pro-inflammatory cytokines, chemokines, and mediators by sCD14 stimulation of RA-FLS was quantified by real-time PCR and ELISA. Cell proliferation was assessed by the BrdU assay. LPS-RS, a Toll-like receptor 4 (TLR-4) antagonist, was used to block TLR-4 signaling.

結果:

可溶性CD14は、IL-6 mRNAの発現とタンパク質の分泌を誘導した。また、TNF-α、IL-8、細胞間接着分子-1（ICAM-1）、MMP-3、RANKリガンド（RANKL）などの他の炎症性サイトカインやメディエーターの発現もsCD14によって誘導された。さらに、sCD14刺激はRA-FLSの増殖を促進した。LPS-RSはsCD14によるIL-6、IL-8、ICAM-1 mRNA誘導を抑制した。一方、TNF-αおよびIL-17AはRA-FLSのTLR-4発現を増加させ、sCD14によるIL-6発現を増幅させた。

RESULTS: Soluble CD14 induced the expression of IL-6 mRNA and secretion of the protein. The expression of other pro-inflammatory cytokines and mediators, such as TNF-α, IL-8, intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1), MMP-3, and RANK ligand (RANKL), was also induced by sCD14. In addition, sCD14 stimulation promoted RA-FLS proliferation. LPS-RS abolished IL-6, IL-8, and ICAM-1 mRNA induction by sCD14 in RA-FLS. On the other hand, TNF-α and IL-17A increased TLR-4 expression by RA-FLS and amplified their sCD14-induced IL-6 expression.

結論:

可溶性CD14はTLR-4を介して炎症シグナルをRA-FLSに伝達する。炎症環境下では、sCD14の効果が増強される可能性がある。これらの結果は、sCD14がRAの病態に関与していることを示唆しており、新たな治療標的となる可能性を示唆している。

CONCLUSIONS: Soluble CD14 transmits inflammatory signals to RA-FLS via TLR-4. The effects of sCD14 may be augmented in inflammatory milieu. Our results suggest that sCD14 is involved in the pathogenesis of RA and may be a novel therapeutic target.