マウスにおけるアジュバントを添加しない新規アンジオテンシンIIペプチドワクチン

A novel angiotensin II peptide vaccine without an adjuvant in mice.

• Ryo Nakamaru
• Hironori Nakagami
• Hiroki Hayashi
• Jiao Sun
• Akiko Tenma
• Koichi Yamamoto
• Munehisa Shimamura
• Ryuichi Morishita
• Hiromi Rakugi

抄録

目的:

我々は、マウスT細胞エピトープとアジュバント作用を併せ持つ新規ペプチドAJP001を開発した。抗原への直接コンジュゲーションは、アジュバントを添加することなく、ペプチドワクチンに有用である。本研究では、アンジオテンシン（Ang）IIとAJP001を結合させたペプチドワクチン（AJ-Ang II）の有効性をマウスを用いて評価した。

OBJECTIVES: We recently developed a novel peptide, AJP001, that possesses both a mouse T-cell epitope and adjuvant action. Direct conjugation to the antigen is useful for peptide vaccines without the addition of adjuvants. In this study, the efficacy of an angiotensin (Ang) II and AJP001-conjugated peptide vaccine (AJ-Ang II) was evaluated in mice.

方法:

抗Ang II抗体価は、2週間間隔でAJ-Ang IIを3回注入した後、Balb/Cマウスにおいて測定した。SBPは、Ang II注入（1"Zs_200A"μg/kg/分）で処理したBalb/Cマウスのワクチン接種中に測定した。

METHODS: The anti-Ang II antibody titer was measured in Balb/C mice following three injections of AJ-Ang II at 2-week intervals. SBP was measured during vaccination of Balb/C mice treated with Ang II infusion (1 μg/kg per min).

結果:

AJ-Ang II処理は、アジュバントを添加することなく、用量依存的に抗Ang II抗体価の上昇をもたらした。体液性免疫応答の解析では、AJ-Ang IIは主にIgG1抗体、IL-4およびIL-10産生を誘発し、酵素結合免疫吸光スポットアッセイで測定した結果、Th2応答の誘導を示唆しています。重要なことに、精製抗体を用いた共処理は、培養血管平滑筋細胞における Ang II 誘導細胞外シグナル調節キナーゼリン酸化および核因子(NF)-κB 活性化を減衰させた。免疫マウスのSBPは非免疫マウスに比べて有意に低かった（135.9"Zs_200A"±"Zs_200A"8.5 vs. 154.9"Zs_200A"16.8"Zs_200A"mmHg, P"Zs_200A"="Zs_200A"0.02）。さらに、Ang IIによって誘発された心臓の血管周囲線維化は、免疫化されたマウスで有意に減衰し、コラーゲンI/IIIおよびトランスフォーミング成長因子-βのmRNA発現の減少も示した。

RESULTS: AJ-Ang II treatment resulted in an increase in the anti-Ang II antibody titer in a dose-dependent manner without the addition of adjuvants. In the analysis of the humoral immune response, AJ-Ang II mainly elicited IgG1 antibodies and IL-4 and IL-10 production, as measured by an enzyme-linked immune absorbent spot assay, which suggests the induction of a Th2 response. Importantly, cotreatment with purified antibodies attenuated Ang II-induced extracellular signal-regulated kinase phosphorylation and nuclear factor (NF)-κB activation in cultured vascular smooth muscle cells. The SBP in immunized mice was significantly lower than that in nonimmunized mice (135.9 ± 8.5 vs. 154.9 ± 16.8 mmHg, P = 0.02). Furthermore, Ang II-induced perivascular fibrosis in the heart was significantly attenuated in immunized mice, which also exhibited decreased mRNA expression of collagen I/III and transforming growth factor-β.

結論:

AJ-Ang IIは、任意のアジュバントを添加することなく、簡単で有用な治療用ペプチドワクチンである可能性がある。

CONCLUSION: AJ-Ang II may be a simple and useful therapeutic peptide vaccine without the addition of any adjuvants.