FZD10 抗体共役リポソームをベースとした制御された 5-FU 投与の大腸がん In vitro モデルでの有効性

Effectiveness of a Controlled 5-FU Delivery Based on FZD10 Antibody-Conjugated Liposomes in Colorectal Cancer In vitro Models.

• Maria Principia Scavo
• Annalisa Cutrignelli
• Nicoletta Depalo
• Elisabetta Fanizza
• Valentino Laquintana
• Giampietro Gasparini
• Gianluigi Giannelli
• Nunzio Denora

抄録

大腸癌（CRC）におけるコントロールデリバリー療法の使用により、毒性や副作用が軽減されます。最近、CRC細胞で過剰発現しているFZDタンパク質ファミリーに属する細胞表面受容体であるFrizzled 10（FZD10）タンパク質が、CRCの標的化および治療のための新規候補であることが示唆されている。ここでは、FZD10に対する抗体で装飾された5-フルオロウラシル（5-FU）を担持した新規免疫リポソーム（抗FZD10/5-FU/LPs）の抗癌効果を、FZD10を過剰発現していることが確認された2つの異なるCRC細胞株、すなわち転移性CoLo-205細胞と非転移性CaCo-2細胞を用いてin vitroで評価した。得られた抗FZD10/5-FU/LPは、テトラゾリウム化合物の還元に基づくMTS細胞増殖アッセイ、スクラッチ試験、電界放出走査型電子顕微鏡(FE-SEM)調査及び免疫蛍光分析により、広範囲に特徴付けされ、前臨床治療効果が評価された。その結果、抗FZD10 /5-FU/LPにカプセル化した場合、5-FUの細胞毒性活性は、遊離の5-FUと比較して、最も低い濃度で試験した場合に増強されることが明らかになった。本研究で提案された免疫リポソームは、将来の臨床応用においては、胃腸障害のないカプセルや座薬にカプセル化して経口または直腸に投与することができるため、CRCの選択的治療のための大きな可能性を秘めている。

The use of controlled delivery therapy in colorectal cancer (CRC) reduces toxicity and side effects. Recently, we have suggested that the Frizzled 10 (FZD10) protein, a cell surface receptor belonging to the FZD protein family that is overexpressed in CRC cells, is a novel candidate for targeting and treatment of CRC. Here, the anticancer effect of novel immuno-liposomes loaded with 5-Fluorouracil (5-FU), decorated with an antibody against FZD10 (anti-FZD10/5-FU/LPs), was evaluated in vitro on two different CRC cell lines, namely metastatic CoLo-205 and nonmetastatic CaCo-2 cells, that were found to overexpress FZD10. The anti-FZD10/5-FU/LPs obtained were extensively characterized and their preclinical therapeutic efficacy was evaluated with the MTS cell proliferation assay based on reduction of tetrazolium compound, scratch test, Field Emission Scanning Electron Microscopes (FE-SEM) investigation and immunofluorescence analysis. The results highlighted that the cytotoxic activity of 5-FU was enhanced when encapsulated in the anti-FZD10 /5-FU/LPs at the lowest tested concentrations, as compared to the free 5-FU counterparts. The immuno-liposomes proposed herein possess a great potential for selective treatment of CRC because, in future clinical applications, they can be encapsulated in gastro-resistant capsules or suppositories for oral or rectal delivery, thereby successfully reaching the intestinal tract in a minimally invasive manner.