Euphorbia umbellataのラテックスの濃縮テルペン画分が白血病細胞のアポトーシスを促進することが明らかになった

Enriched terpenes fractions of Euphorbia umbellata latex promote apoptosis in leukemic cells.

• Luiza Stolz Cruz
• Carla Cristine Kanunfre
• Evelyn Assis de Andrade
• Alexandre Alves de Oliveira
• Laura Stolz Cruz
• Mariane de Faria Moss
• Guilherme Lanzi Sassaki
• Leociley Rocha Alencar Menezes
• Mei Wang
• Ikhlas Ahmad Khan
• Flávio Luís Beltrame

抄録

本研究では、Euphorbia umbellata ラテックスのヘキサン抽出物の白血病細胞に対するバイオガイデッド分画を行った。試料をNMR, GC-MS, トリテルペンの定量, MTT還元アッセイで分析した。ジクロロメタン画分とエタノール画分については形態学的解析、細胞周期解析、ミトコンドリア膜電位解析、カスパーゼ3/7解析を行い、ジクロロメタン画分については選択性指数を算出した。NMR分析ではテルペンとステロイドの特徴的なシグナルが示され、トリテルペンの定量とGC-MS分析でデータが確認された。MTT還元アッセイでは、HL-60がジクロロメタン画分およびエタノール画分に対して最も感受性の高い細胞株であることが示された。これらのマトリックスの化合物は、アポトーシス誘導、細胞周期の変化、脱分極した集団細胞の増加、カスパーゼ3/7の活性化に対応した形態変化を引き起こした。選択性指標は22.44以上であった。本研究では、Euphorbia umbellataラテックスの白血病細胞に対するヘキサン抽出物の生物学的分画を行い、その細胞毒性がアポトーシス経路と関連していることを明らかにした。本研究では、白血病細胞に対するユーフォルビアウンベラータラテックス抽出物の生物学的分画を行った。ジクロロメタン画分とエタノール画分については形態学的解析、細胞周期解析、ミトコンドリア膜電位解析、カスパーゼ3/7解析を行い、ジクロロメタン画分については選択性指数を算出した。NMR分析ではテルペンとステロイドの特徴的なシグナルが示され、トリテルペンの定量とGC-MS分析でデータが確認された。MTT還元アッセイでは、HL-60がジクロロメタン画分およびエタノール画分に対して最も感受性の高い細胞株であることが示された。これらのマトリックスの化合物は、アポトーシス誘導、細胞周期の変化、脱分極した集団細胞の増加、カスパーゼ3/7の活性化に対応した形態変化を引き起こした。選択性指標は22.44以上であった。バイオガイデッド分画法により、E. umbellataのラテックスのサンプルは白血病細胞に対してフィトコンプレックスの活性を高め、細胞毒性はアポトーシス経路と関連している可能性があることが示された。

The current study was carried out by a bioguided-fractionation of a hexane extract of Euphorbia umbellata latex against leukemic cells. Samples were analyzed by NMR, GC-MS, triterpenes quantification, and MTT reduction assay. Morphological, cell cycle, mitochondrial membrane potential and caspases 3/7 analyses were performed for the dichloromethane and ethanol fractions, and selectivity index for the dichloromethane fraction. NMR analysis presented characteristic signals of terpenes and steroids, data were confirmed by the quantification of triterpenes and GC-MS analysis. MTT reduction assay demonstrated that HL-60 was the most sensitive cell lineage against dichloromethane and ethanol fractions. Compounds of these matrices caused morphological changes compatible with apoptosis induction, altered cell cycle, increment of depolarized population cells and activation of caspases 3/7. Selectivity indices was higher than 22.44. Bioguided-fractionation study showed that samples of the latex of E. umbellata raised the activity of the phytocomplex against leukemic cells, and the cytotoxicity can be associated with an apoptosis pathway.The current study was carried out by a bioguided-fractionation of a hexane extract of Euphorbia umbellata latex against leukemic cells. Samples were analyzed by NMR, GC-MS, triterpenes quantification, and MTT reduction assay. Morphological, cell cycle, mitochondrial membrane potential and caspases 3/7 analyses were performed for the dichloromethane and ethanol fractions, and selectivity index for the dichloromethane fraction. NMR analysis presented characteristic signals of terpenes and steroids, data were confirmed by the quantification of triterpenes and GC-MS analysis. MTT reduction assay demonstrated that HL-60 was the most sensitive cell lineage against dichloromethane and ethanol fractions. Compounds of these matrices caused morphological changes compatible with apoptosis induction, altered cell cycle, increment of depolarized population cells and activation of caspases 3/7. Selectivity indices was higher than 22.44. Bioguided-fractionation study showed that samples of the latex of E. umbellata raised the activity of the phytocomplex against leukemic cells, and the cytotoxicity can be associated with an apoptosis pathway.

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