DNGR-1樹状細胞による死細胞関連抗原の交差提示は、マウスの慢性的な移植片拒絶に寄与する

Cross-presentation of dead-cell-associated antigens by DNGR-1 dendritic cells contributes to chronic allograft rejection in mice.

• Saidou Balam
• Rebecca Kesselring
• Eggenhofer Elke
• Stephanie Blaimer
• Katja Evert
• Matthias Evert
• Hans J Schlitt
• Edward K Geissler
• Janneke van Blijswijk
• Sonia Lee
• Caetano Reis E Sousa
• Stefan M Brunner
• Stefan Fichtner-Feigl

抄録

本研究の目的は、移植後に死細胞関連抗原のDNGR-1依存性交差提示が発生し、CD8 T細胞応答、慢性的な移植片拒絶（CAR）および線維化に寄与するかどうかを明らかにすることであった。BALB/cまたはC57BL/6の心臓を、野生型（WT）、Clec9aまたはBatf3レシピエントのC57BL/6マウスに異種移植した。全移植片を免疫組織化学、ウェスタンブロット、qRT-PCR、フローサイトメトリーを用いて、細胞浸潤、CD8 T細胞活性化、線維形成、CARについて分析した。すべての移植片は、受信者のDNGR-1 DCによる浸潤、CARと線維化の兆候を示しました。Clec9a レシピエントの全移植片は、WT レシピエントと比較して CAR（P<0.0001）、線維化（P=0.0137）、CD8 細胞浸潤（P<0.0001）、エフェクターサイトカインレベルの低下を示した。Batf3欠損は、DNGR-1 DC浸潤、CAR（P<0.0001）、線維化（P=0.0382）を大幅に減少させた。シトクロムc治療を受けた移植片に浸潤するCD8細胞は、CD8エフェクターサイトカインの産生の減少を示した(P<0.05)。さらに、間接経路であるIFN-γ ELISPOTにおける反応性CD8 T細胞応答は、Clec9aレシピエントマウスにおいて減少した（P = 0.0283）。受容体の遺伝的排除に類似した抗体によるDNGR-1の遮断は、CAR（P = 0.0003）、線維化（P = 0.0273）、CD8細胞の浸潤（P = 0.0006）およびエフェクターサイトカインレベルを減少させた。DNGR-1 DCによるDNGR-1依存性アロアンチンクロスプレゼンテーションは、CARおよび線維化を誘導するアロアンチン活性CD8細胞を誘導する。DNGR-1に対する抗体は、このプロセスをブロックし、CARおよび線維化を予防することができる。この記事は著作権で保護されています。すべての権利を保有しています。

The purpose of this study was to elucidate whether DNGR-1-dependent cross-presentation of dead-cell-associated antigens occurs after transplantation and contributes to CD8 T cell responses, chronic allograft rejection (CAR) and fibrosis. BALB/c or C57BL/6 hearts were heterotopically transplanted into wild type (WT), Clec9a or Batf3 recipient C57BL/6 mice. Allografts were analysed for cell infiltration, CD8 T cell activation, fibrogenesis and CAR using immunohistochemistry, Western blot, qRT -PCR and flow cytometry. Allografts displayed infiltration by recipient DNGR-1 DCs, signs of CAR and fibrosis. Allografts in Clec9a recipients showed reduced CAR (P<0.0001), fibrosis (P = 0.0137), CD8 cell infiltration (P<0.0001) and effector cytokine levels compared to WT recipients. Batf3-deficiency greatly reduced DNGR-1 DC-infiltration, CAR (P<0.0001) and fibrosis (P = 0.0382). CD8 cells infiltrating allografts of cytochrome c treated recipients, showed reduced production of CD8 effector cytokines (P<0.05). Further, alloreactive CD8 T cell response in indirect pathway IFN-γ ELISPOT was reduced in Clec9a recipient mice (P = 0.0283). Blockade of DNGR-1 by antibody, similar to genetic elimination of the receptor, reduced CAR (P = 0.0003), fibrosis (P = 0.0273), infiltration of CD8 cells (P = 0.0006) and effector cytokine levels. DNGR-1-dependent alloantigen cross-presentation by DNGR-1 DCs induces alloreactive CD8 cells that induce CAR and fibrosis. Antibody against DNGR-1 can block this process and prevent CAR and fibrosis. This article is protected by copyright. All rights reserved.

This article is protected by copyright. All rights reserved.