Hsa_circ_0001806はCOL1A1を増加させることで大腸がん細胞のステミングを促進するceRNAとして働く

Hsa_circ_0001806 Acts as a ceRNA to Facilitate the Stemness of Colorectal Cancer Cells by Increasing COL1A1.

• Jie Sun
• Jie Liu
• Qilin Zhu
• Feng Xu
• Liumin Kang
• Xiaohua Shi

抄録

背景:

サーキュラーRNA（circRNA）の異常発現は、がんの新しい形質として同定されている。しかし、大腸がん（CRC）におけるcircRNAの役割はまだ解明されていません。

Background: The aberrant expression of circular RNAs (circRNAs) has been identified as a novel trait of cancers. However, the role of circRNAs in colorectal cancer (CRC) remains to be elucidated.

方法:

CRC組織および隣接組織のcircRNAを同定するためにインフォマティック解析を行った。球形、ALDH活性、幹細胞マーカー発現、腫瘍形成能アッセイを用いて、CRC細胞の幹細胞化におけるhsa_circ_001806の役割を解析するために、機能獲得実験と機能喪失実験を構築した。CCK8細胞の生存率は、CRC細胞の生存率におけるhsa_circ_0001806の役割を評価するために実施した。ルシフェラーゼレポーターとプルダウンアッセイを用いて、その基礎となるメカニズムを明らかにした。

Methods: Informatic analysis was performed to identify circRNAs in CRC tissues and adjacent tissues. Gain- and loss-of-function experiments were constructed to analyze hsa_circ_001806 roles in CRC cell stemness by sphere-formation, ALDH activity, stemness marker expression and tumor-initiating ability assays. CCK8 cell viability was carried out to evaluate hsa_circ_0001806 roles in CRC cell viability. Luciferase reporter and pull-down assays were used to reveal the underlying mechanisms.

研究成果:

Hsa_circ_0001806 は CRC 組織において有意に高発現し、TNM ステージ、浸潤の深さ、リンパ転移、遠隔転移と相関していた。Hsa_circ_0001806 は CRC 細胞の球形成能、ALDH1 活性、幹細胞マーカーの発現を増加させることで明らかなように、幹細胞の増殖を促進したが、細胞の生存率には影響を与えなかった。メカニズム的には、hsa_circ_0001806 と COL1A1 の間には同じ miR-193-5p 結合部位が共有されている。Hsa_circ_0001806 は、COL1A1 の発現を miR-193-5p 依存的にアップレギュレーションしており、これは hsa_circ_0001806 による CRC 細胞の幹細胞化制御に不可欠である。

Results: Hsa_circ_0001806 was significantly upregulated in CRC tissues and correlated with TNM stage, depth of invasion, lymphatic metastasis and distant metastasis. Hsa_circ_0001806 promoted the stemness of CRC cells, as evident by increasing sphere-formation ability, ALDH1 activity and stemness marker expression while had no effect on cell viability. Mechanistically, the same miR-193-5p-binding sites are shared between hsa_circ_0001806 and COL1A1. Hsa_circ_0001806 upregulates COL1A1 expression in a miR-193-5p-dependent manner, which is essential for hsa_circ_0001806-mediated regulation on CRC cell stemness.

結論:

circRNA hsa_circ_0001806 は、hsa_circ_0001806/miR-193a-5p/COL1A1 軸を活性化することで、CRC 細胞の幹細胞化を促進することで、有望な治療標的となる可能性がある。

Conclusion: CircRNA hsa_circ_0001806 may act as a promising therapeutic target by facilitating the stemness of CRC cells via activating the hsa_circ_0001806/miR-193a-5p/COL1A1 axis.

© 2020 Sun et al.