FGF1はH9c2細胞のH₂O₂誘導ミトコンドリア依存性アポトーシスを阻害する

FGF1 inhibits H₂O₂-induced mitochondrion-dependent apoptosis in H9c2 cells.

• Yanhui Chu
• Luxin Li
• Yong Liu
• Yan Wu
• He Bai
• Jieting Liu
• Xiaohuan Yuan
• Zhen Zhang

抄録

本研究の目的は、過酸化水素(H₂O₂)によって誘導されたH9c2細胞の酸化ストレス傷害に対する線維芽細胞増殖因子1(FGF1)の保護効果とそのメカニズムを明らかにすることであった。H9c2細胞の活性に及ぼす様々な濃度のH₂O₂とFGF1の影響をReal Time Cell Analysis(RTCA)により解析した。蛍光プローブを用いて活性酸素量、カルシウムイオン量、ミトコンドリア膜電位、アポトーシスを検出し、リアルタイムPCR法を用いてBcl-2、Bax、Caspase-3のmRNA発現を検出し、FGF1が酸化的ダメージによる心筋細胞のアポトーシスに抵抗する能力を有しているかどうかを評価した。その結果、200μMのH₂O₂を12時間、100μMのH₂O₂を12時間処理することで、H9c2細胞の増殖を抑制することができた。g/mlのFGF1は、H9c2細胞の増殖率、ミトコンドリア膜電位、Bcl-2のmRNA発現を増加させ、H₂O₂による活性酸素蓄積、アポトーシス、細胞内カルシウム量、Bax、Caspase-3のmRNA発現を減少させることができた。その結果、FGF1はミトコンドリア機能を改善することで酸化ストレスを調節し、H9c2細胞のH₂O₂誘発アポトーシスを抑制できることが明らかになった。

The goal of this research was to reveal the protective effect and mechanism of fibroblast growth factor-1 (FGF1) on oxidative stress injury of H9c2 cells induced by hydrogen peroxide (H₂O₂). The effects of various concentrations of H₂O₂ and FGF1 on the activity of H9c2 cells were analyzed by Real Time Cell Analysis (RTCA). The content of ROS, calcium ion, mitochondrial membrane potential and apoptosis were detected by fluorescence probe, the mRNA expression of Bcl-2, Bax and Caspase-3 were detected by real-time PCR to evaluate whether FGF1 has ability to resist the apoptosis of cardiomyocytes caused by oxidative damage. The results showed that the proliferation of H9c2 cells could be inhibited after being treated with 200 μM H₂O₂ for 12 h, and 100 μg/ml FGF1 could increase the proliferation rate of H9c2 cells, mitochondrial membrane potential and the mRNA expression of Bcl-2, and reduce the ROS accumulation, the level of apoptosis, the content of intracellular calcium and the mRNA expression of Bax and Caspase-3 caused by H₂O₂. The results showed that FGF1 could regulate oxidative stress by improving mitochondrial function and inhibit the H₂O₂-induced apoptosis in H9c2 cells.