ペギル化リポソームドキソルビシンとβ-カロチンのJARおよびJEG-3絨毛がんヒト細胞培養モデルに対する効果の比較

The comparison of Pegylated Liposomal Doxorubicin and Beta-Carotene effects on JAR and JEG-3 choriocarcinoma human cell culture models

• Seyit Ahmet Erol
• Görker Sel
• Mehmet İbrahim Harma
• Müge Harma
• İshak Özel Tekin

抄録

目的:

本研究の目的は、ペギル化リポソームドキソルビシン（PLD）、β-カロチン、およびPLDとβ-カロチンの組み合わせのCC治療に対するJARおよびJEG-3ヒト絨毛がん（CC）細胞株への有効性を検討することであった。

Objectives: The aim of this study was to investigate the effectiveness of pegylated liposomal doxorubicin (PLD), beta-carotene, and a combination of PLD and beta-carotene on JAR and JEG-3 human choriocarcinoma (CC) cell lines for the treatment of CC.

材料と方法:

JAR細胞およびJEG-3細胞を培養した。ＰＬＤ、β-カロテン試験群は、異なる用量で決定した（単剤試験の場合；ＰＬＤ１、２、５μｇ／ｍｌとβ-カロテン１、５、１０μｇ／ｍｌ、併用試験の場合；全ＰＬＤ用量とβ-カロテン５μｇ／ｍｌを併用）。薬物を細胞に同時に投与し、薬物投与の72時間後にトリプシン-エチレンジアミン四酢酸溶液を用いて細胞を剥離した。アポトーシス細胞の割合は、アネキシンＶ染色後、フローサイトメトリーにより決定した。上清の１セットをトリプシン塗布前に採取し、β-ヒト絨毛性ゴナドトロピン（β-hCG）および高糖化hCG（H-hCG）レベルを調査した。アポトーシス比の統計解析は、SPSS 19.0、Shapiro Wilk、Mann Whitney UおよびKruskal-Wallis検定を用いて行った。

Material and Methods: JAR and JEG-3 cells were cultured. PLD, beta-carotene trial groups were determined with different doses (for single drug trial; PLD 1, 2, 5 μg/ml and beta-carotene 1, 5, 10 μg/ml, and for combined drug trial; all PLD doses combined with beta-carotene 5 μg/ml). Drugs were administered to the cells simultaneously, and 72 hours after drug administration, the cells were detached using trypsin-ethylenediamine tetraacetic acid solution. The percentage of apoptotic cells was determined by flow cytometry after Annexin V staining. One set of the supernatant was collected before trypsin application to investigate beta-human chorionic gonadotropin (β-hCG) and hyperglycosylated hCG (H-hCG) levels. Statistical analyses of the apoptotic ratios were performed using SPSS 19.0, Shapiro Wilk, Mann Whitney U and Kruskal-Wallis tests.

結果:

すべての用量のPLDで処理した後、JARとJEG-3ヒトCC細胞培養物でアポトーシスが増加した(p<0.05)。各β-カロテンの単回投与量では、JAR細胞ではアポトーシスが増加した(p<0.05)が、JEG-3細胞ではアポトーシス効果は認められなかった。PLDとβ-カロテンの併用群では、JARとJEG-3の両方でアポトーシスが増加した(p<0.05)。

Results: The apoptosis increased in JAR and JEG-3 human CC cell cultures after treatment with all doses of PLD (p<0.05). A single application of each beta-carotene doses increased the apoptosis in JAR cells (p<0.05) but had no apoptotic effects on JEG-3 cells. In the PLD and beta-carotene combination group, the apoptosis increased in both JAR and JEG-3 cells (p<0.05).

結論:

我々の知る限りでは、これは2つの異なるCC細胞株におけるPLD、β-カロテン、およびPLD＋β-カロテンの併用療法の有効性を検討した最初の研究である。PLDは有望な化学療法薬であり、β-カロテンはCC治療のための新しい非化学療法薬として使用することができる。本研究の結果に基づき、将来的には予防策としてのビタミンAの補給が検討される可能性がある。しかし、これらのデータは動物実験や臨床試験による裏付けが必要である。

Conclusion: To our knowledge, this is the first investigation of the effectiveness of PLD, beta-carotene, and PLD + beta-carotene combination therapy in two different CC cell lines. PLD is a promising chemotherapeutic drug, and beta-carotene can be used as a novel non-chemotherapeutic agent for treatment of CC. Based on the results of this study, vitamin A supplementation as preventive measure can be considered in the future. However, these data need support from animal experiments and clinical trials.