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市販の磁気ビーズベースのマルチプレックスアッセイを用いた、イヌ血清中の急性腎障害の5つの新規バイオマーカーの検証
Validation of a commercial magnetic bead-based multiplex assay for 5 novel biomarkers of acute kidney injury in canine serum.
PMID: 32627718 DOI: 10.1177/1040638720939520.
抄録
急性腎障害の診断のための新しいバイオマーカーの測定に関心が高まっている。多重測定法は迅速かつ費用対効果の高い測定方法となる可能性があるが、イヌでの使用に関する情報はほとんど発表されていない。我々は、市販の磁気ビーズベースのアッセイを用いて、クラスターチン（Clus）、シスタチンC（CysC）、腎障害分子1（KIM-1）、単球化学吸引性タンパク質1（MCP-1）、好中球ゼラチナーゼ関連リポカリン（NGAL）の5つのバイオマーカーの有効性を検証することを目的とした。健康な犬と病気の犬の血清を使用して、アッセイ内とアッセイ間の不正確さ、希釈下での直線性（LUD）、スパイクリカバリー（S-R）、およびヘモグロビン干渉を評価しました。さらに、サンプルタイプ（血清対血漿）の効果を調査しました。ClusとMCP-1のすべての値は、アッセイの測定可能範囲外であった。アッセイ内およびアッセイ間の精度はNGALについては許容範囲内であった（CVsはそれぞれ8.8％および13.2％）。LUDとS-Rの回帰分析により、CysCとNGALについて良好な直線性が示された。溶血はどのバイオマーカーの測定にも影響を与えなかった。CysC（=0.018）およびNGAL（=0.015）の測定値は、クエン酸ナトリウム血漿中の濃度が血清と比較して有意に低かった。我々は、この磁気ビーズベースのアッセイは、イヌ血清中のNGAL測定のための正確かつ正確であると結論付けた。MCP-1およびClusの基準が不適切であり、KIM-1測定の精度が低いことから、この測定法ではイヌの血液中のこれらのバイオマーカーを確実に定量できないことが示唆された。この測定法を使用したイヌの血液中の CysC の測定は、測定間の不正確さに注意して解釈する必要があります。
Interest is growing in measurement of novel biomarkers for the diagnosis of acute kidney injury. Multiplex assays may provide a rapid and cost-effective way of measurement; however, sparse information is published regarding their use in dogs. We aimed to validate a commercial magnetic bead-based assay for 5 biomarkers: clusterin (Clus), cystatin C (CysC), kidney injury molecule 1 (KIM-1), monocyte chemoattractant protein 1 (MCP-1), and neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL). Intra- and inter-assay imprecision, linearity under dilution (LUD), spike recovery (S-R), and hemoglobin interference were evaluated using serum from healthy and diseased dogs. Additionally, the effect of sample type (serum vs. plasma) was investigated. All values for Clus and MCP-1 were outside the assay's measurable range. Intra- and inter-assay precision were acceptable for NGAL (CVs 8.8% and 13.2%, respectively). Regression analysis of LUD and S-R indicated good linearity for CysC and NGAL. Hemolysis did not affect measurement of any biomarker. Measured concentrations of CysC ( = 0.018) and NGAL ( = 0.015) were significantly lower in sodium citrate plasma compared to serum. We conclude that this magnetic bead-based assay is precise and accurate for NGAL measurement in canine serum. Inappropriate standards for MCP-1 and Clus, and poor accuracy for KIM-1 measurement, suggest that this assay cannot reliably quantify those biomarkers in canine blood. Measurements of CysC in canine blood using this assay must be interpreted with caution given inter-assay imprecision.