NF-κB 抑制を介した ACT001 の三陰性乳癌細胞株 4T1 における抗癌効果の検討

Anticancer Effects of ACT001 via NF-κB Suppression in Murine Triple-Negative Breast Cancer Cell Line 4T1.

• Yanyang Liu
• Li Wang
• Jiewei Liu
• Xiaoxiao Xie
• Haoyue Hu
• Feng Luo

抄録

目的:

ACT001は、エストロゲン受容体陽性乳がん細胞におけるタモキシフェン抵抗性の逆転などの抗がん作 用を有する新規セスキテルペン系ラクトン誘導体である。しかし、悪性度が高く、予後不良ながんであるトリプルネガティブ乳がん（TNBC）に対するACT001の抗がん作用については、これまでほとんど研究が行われていませんでした。本研究では、ACT001のTNBCに対する効果とその機序を明らかにすることを目的としています。

Purpose: ACT001 is a novel sesquiterpene lactone derivative with anticancer effects, including the reversal of tamoxifen resistance in estrogen receptor-positive breast cancer cells. However, few studies have investigated the anticancer effects of ACT001 in triple-negative breast cancer (TNBC), a highly aggressive cancer with a poor prognosis. This study aimed to investigate the effects of ACT001 on TNBC and the potential mechanism underlying these effects.

材料と方法:

ACT001のマウスTNBC細胞株4T1に対する抗癌効果を、Cell Counting Kit-8アッセイ、動物実験、TUNEL染色、フローサイトメトリー、免疫蛍光、酵素結合免疫吸着法、ウェスタンブロッティング解析により評価した。

Materials and Methods: The anticancer effects of ACT001 on the murine TNBC cell line 4T1 were evaluated by Cell Counting Kit-8 assay, animal experiments, TUNEL staining, flow cytometry, immunofluorescence, enzyme-linked immunosorbent assay, and Western blotting analysis.

結果:

ACT001は、4T1細胞において、B細胞リンパ腫2-関連Xタンパク質の発現を増加させることにより、アポトーシスを誘導した。さらに、ACT001は、4T1腫瘍における分泌性顆粒球-マクロファージコロニー刺激因子（GM-CSF）のレベルを著しく低下させ、骨髄由来サプレッサー細胞（MDSC）の数を減少させ、血管新生を減少させた。さらに、GM-CSFは用量依存的に血管新生を促進し、MDSCの増殖を促進した。最後に、ACT001は4T1細胞のphospho-NF-κBおよびIκB-αレベルを抑制し、GM-CSFレベルをさらに低下させた。

Results: ACT001 induced apoptosis in 4T1 cells by upregulating B cell lymphoma 2-associated X protein expression. Moreover, ACT001 markedly decreased levels of secretory granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) in 4T1 tumors, decreased the number of myeloid-derived suppressor cells (MDSCs), and reduced angiogenesis. Furthermore, GM-CSF promoted angiogenesis and the proliferation of MDSCs in a dose-dependent manner. Finally, ACT001 suppressed phospho-NF-κB and IκB-α levels in 4T1 cells, thereby further decreasing GM-CSF levels.

結論:

これらの結果から、ACT001は、マウスTNBC細胞株4T1においてアポトーシスを誘導することで抗がん作用を発揮し、4T1腫瘍における血管新生やMDSCの蓄積を抑制することで腫瘍の微小環境を制御していることが示唆されました。また、NF-κB 活性の抑制が関与している可能性が示唆された。

Conclusion: Our results suggest that ACT001 exerts its anticancer effects by inducing apoptosis in murine TNBC cell line 4T1 and regulates the tumor microenvironment by attenuating angiogenesis and accumulation of MDSCs in 4T1 tumors. The underlying mechanism may involve the suppression of NF-κB activity.

© 2020 Liu et al.