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病理組織標本中のアミロイド蛋白質の質量分析法による絶対定量。そのメリットと限界
Mass spectrometry-based absolute quantification of amyloid proteins in pathology tissue specimens: Merits and limitations.
PMID: 32609750 PMCID: PMC7329117. DOI: 10.1371/journal.pone.0235143.
抄録
臨床現場や全身性アミロイドーシスに関する研究におけるアミロイド蛋白質の定量分析の意義を明らかにするため、ホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）組織に対して、同位体標識無細胞製剤（MS-QBIC）を用いた質量分析法を適用した。この手法は、FFPE標本のコンゴ赤染色病変のレーザーマイクロダイセクションで採取したアミロイド組織に適用した。血清アミロイドA（SAA）、トランスサイレチン（TTR）、免疫グロブリンκ軽鎖（IGK）、免疫グロブリンλ軽鎖（IGL）、β-2-ミクログロブリン（B2M）、アポリポ蛋白質（Apo）A1、Apo A4、Apo E、リゾチーム、Apo A2、ゲルソリン、フィブリノーゲンα鎖を含む13種類のアミロイド前駆体蛋白質のうち12種類の蛋白質の定量に成功した。白血球細胞由来のケモタキシン-2は検出されなかった。SAA、TTR、IGK、IGL、およびB2Mの定量は、免疫組織化学的な結果が決定的でない場合でも、責任のあるタンパク質を確認した。Apo A1、Apo A4、およびApo Eは、責任タンパク質と並行してかなりの量が沈着していた。MS-QBICによるアミロイド蛋白質の定量は、全身性アミロイドーシスの分類や研究に有用である。
To clarify the significance of quantitative analyses of amyloid proteins in clinical practice and in research relating to systemic amyloidoses, we applied mass spectrometry-based quantification by isotope-labeled cell-free products (MS-QBIC) to formalin-fixed, paraffin-embedded (FFPE) tissues. The technique was applied to amyloid tissues collected by laser microdissection of Congo red-stained lesions of FFPE specimens. Twelve of 13 amyloid precursor proteins were successfully quantified, including serum amyloid A (SAA), transthyretin (TTR), immunoglobulin kappa light chain (IGK), immunoglobulin lambda light chain (IGL), beta-2-microglobulin (B2M), apolipoprotein (Apo) A1, Apo A4, Apo E, lysozyme, Apo A2, gelsolin, and fibrinogen alpha chain; leukocyte cell-derived chemotaxin-2 was not detected. The quantification of SAA, TTR, IGK, IGL, and B2M confirmed the responsible proteins, even when the immunohistochemical results were not decisive. Considerable amounts of Apo A1, Apo A4, and Apo E were deposited in parallel amounts with the responsible proteins. Quantification of amyloid protein by MS-QBIC is feasible and useful for the classification of and research on systemic amyloidoses.