CircRNA SMARCC1はmiR-140-3pをスポンジ化し、大腸がんの細胞進行を制御する

CircRNA SMARCC1 Sponges MiR-140-3p to Regulate Cell Progression in Colorectal Cancer.

• Miao-Sheng Chen
• Cui-Hong Lin
• Ling-Yan Huang
• Xiao-Ming Qiu

抄録

目的:

我々の目的は、circSMARCC1が大腸がん（CRC）の発生および生物学的行動に及ぼす影響を調べることであった。

Purpose: Our objective was to investigate the effect of circSMARCC1 on the developmental and biological behavior of colorectal cancer (CRC).

材料と方法:

ＣＲＣ組織および細胞株（ＳＷ６２０、ＨＣＴ１１６、ＨＴ２９およびＳＷ４８０）および正常細胞株（ＮＣＭ４６０）におけるｃａｒｃＳＡＭＲＣＣ１およびｍｉＲ-１４０-３ｐの発現を、ｑＲＴ-ＰＣＲを用いて検出した。circSMARCC1およびその線形サブタイプの発現レベルを検出した。SW620細胞株におけるcircSAMRCC1とmiR-140-3pの局在の評価のために蛍光in situハイブリダイゼーションを行った。circSAMRCC1とmiR-140-3pの細胞増殖への影響を、それぞれCCK8アッセイとコロニー形成アッセイを用いて調べた。circSAMRCC1とmiR-140-3pの細胞遊走および浸潤に対する効果は、Transwellアッセイを用いて決定した。circSMARCC1とmiR-140-3pの間の結合関係は、バイオインフォマティクス、ChIRP分析およびダブルルシフェラーゼレポーターアッセイによってさらに評価された。

Materials and Methods: The expression of circSAMRCC1 and miR-140-3p in CRC tissues and cell lines (SW620, HCT116, HT29 and SW480) and a normal cell line (NCM460) was detected using qRT-PCR. The expression levels of circSMARCC1 and its linear subtype were detected. Fluorescence in situ hybridization was performed for the evaluation of the localization of circSAMRCC1 and miR-140-3p in the SW620 cell line. The effects of circSAMRCC1 and miR-140-3p on cell proliferation were investigated using CCK8 and colony formation assays, respectively. The effects of circSAMRCC1 and miR-140-3p on cell migration and invasion were determined using Transwell assay. The binding relationship between circSMARCC1 and miR-140-3p was further assessed by bioinformatics, ChIRP analysis and double luciferase reporter assay.

結果:

CRC組織および4つの細胞株におけるcircSMARCC1の発現は有意に増加しており、circSMARCC1とmiR-140-3pは組織内の発現レベルと負の相関を示した。circSMARCC1のダウンレギュレーションはCRC細胞の生存率を低下させ、in vitroでの転移を抑制し、Inhibition of protein (MMP-2, MMP-9, VEGF) expression. miR-140-3pはCRC組織でダウンレギュレーションされており、miR-140-3p mimicsはSW620細胞の生存率、遊走、浸潤を抑制し、miR-140-3p阻害剤はCRC細胞の細胞増殖、遊走、浸潤に対するcircSMARCC1ダウンレギュレーションの影響を逆転させた。

Results: The expression of circSAMRCC1 in the CRC tissues and four cell lines is significantly increased, and circSMARCC1 and miR-140-3p are negatively correlated with expression level in the tissue. The downregulation of circSMARCC1 decreased CRC cell viability and suppressed metastasis in vitro and Inhibition of protein (MMP-2, MMP-9, VEGF) expression. miR-140-3p is downregulated in CRC tissues; miR-140-3p mimics inhibited SW620 cell viability, migration and invasion, and miR-140-3p inhibitors reversed the the effect of circSMARCC1 downregulation on cell proliferation, migration and invasion in CRC cells.

結論:

circSMARCC1はmiR-140-3pと競合的に結合し、circSMARCC1/miR-140-3p/MMPs軸を介してCRC発がん物質として機能し、CRC治療のバイオマーカーとしての可能性を示した。

Conclusion: circSMARCC1 competitively combined with miR-140-3p and functioned through a circSMARCC1/miR-140-3p/MMPs axis as a CRC carcinogen, demonstrating its potential as a biomarker for CRC treatment.

© 2020 Chen et al.