lncRNA MT1JP の過剰発現は、miR-24-3p を調節することにより、肝細胞癌細胞のアポトーシスと遊走を促進することが明らかになった

Overexpression of lncRNA MT1JP Mediates Apoptosis and Migration of Hepatocellular Carcinoma Cells by Regulating miR-24-3p.

• Qiu-Li Shan
• Ning-Ning Chen
• Gui-Zhi Meng
• Fan Qu

抄録

目的:

本研究の目的は、肝細胞癌細胞のアポトーシスおよび遊走に対するロングノンコーディング（lnc）RNA MT1JPの効果を調べることである。

Objective: This study aimed to determine the effects of the long non-coding (lnc) RNA MT1JP on the apoptosis and migration of hepatocellular carcinoma cells.

患者さんと方法:

遼城第二人民病院に入院した肝癌患者を本研究の対象とした。肝細胞癌細胞にMT1JPとmiR-24-3pをトランスフェクションし、それらの発現とアポトーシスおよび遊走への影響を評価した。相関関係は、デュアルルシフェラーゼレポーターとRNA結合タンパク質共沈法を用いて検証した。

Patients and Methods: Patients with liver cancer admitted to the Second People's Hospital of Liaocheng were included in this study. We transfected hepatocellular carcinoma cells with MT1JP and miR-24-3p and assessed their expression and effects on apoptosis and migration. Correlations were verified using a dual-luciferase reporter and RNA-binding protein coimmunoprecipitation.

結果:

MT1JPの発現はダウンレギュレーションされていたが（P < 0.05）、肝癌ではmiR-24-3pの発現はアップレギュレーションされていた。血清中MT1JPレベルは、腫瘍の大きさ、α-フェトプロテイン（AFP）、TNM病期、分化、リンパ節転移と相関していた。MT1JPの過剰発現とmiR-24-3pの阻害はいずれも細胞の増殖と遊走を抑制し、アポトーシス率を増加させた。また、細胞移動関連タンパク質であるマトリックスメタロプロテアーゼ-2, -9（MMP-2, MMP-9）の発現を有意に低下させた（P < 0.05）。また、アポトーシスに関与するBcl-2関連Xタンパク質(Bax)とシステイニルアスパラギン酸特異的プロテイナーゼ(Caspase-3と-9)の発現を上昇させた。これらはB細胞リンパ腫/白血病2（Bcl-2; P < 0.05）の発現を低下させた。MT1JPとmiR-24-3pの標的関係は、デュアルルシフェラーゼ遺伝子レポーターアッセイとRNA結合タンパク質共沈法を用いて同定された。MT1JPの過剰発現はmiR-24-3pの発現を有意に低下させた（P < 0.05）。MT1JPとmiR-24-3p発現は肝臓癌組織において負の相関を示した（r = -0.561, P < 0.001; Pearson χ検定）。また、肝細胞癌細胞において、miR-24-3pの発現をアップレギュレーションすることで、MT1JPの過剰発現を抑制することが可能であることが示された。

Results: The expression of MT1JP was downregulated (P < 0.05), whereas that of miR-24-3p was upregulated in liver cancer. Serum MT1JP levels were correlated with tumor size, alpha-fetoprotein (AFP), TNM stage, differentiation, and lymph node metastasis. Both MT1JP overexpression and miR-24-3p inhibition inhibited cellular proliferation and migration and increased apoptosis rates. They significantly downregulated expression of the cell migration-associated proteins matrix metalloproteinase -2, -9 (MMP-2, MMP-9) (P < 0.05). They upregulated the expression of Bcl-2-related X protein (Bax) and cysteinyl aspartate-specific proteinases (Caspase-3 and -9) proteins that are involved in apoptosis. They decreased expression of B-cell lymphoma/leukemia-2 (Bcl-2; P < 0.05). A target relationship between MT1JP and miR-24-3p was identified using dual-luciferase gene reporter assays and RNA-binding protein coimmunoprecipitations. MT1JP overexpression significantly downregulated miR-24-3p expression (P < 0.05). MT1JP and miR-24-3p expression were negatively correlated in liver cancer tissues (r = -0.561, P < 0.001; Pearson χ tests). Rescue experiments showed that upregulating miR-24-3p expression could counteract MT1JP overexpression in hepatocellular carcinoma cells.

結論:

MT1JPは低発現であってもmiR-24-3pを制御することで肝癌細胞の増殖、アポトーシス、遊走に関与している。

Conclusion: MT1JP, even when expressed at low levels, participates in the proliferation, apoptosis, and migration of liver cancer cells by regulating miR-24-3p.

© 2020 Shan et al.