Hsa_circRNA_000166 大腸がんにおけるmiR-330-5p/ELK1の制御による細胞増殖、移行、浸潤を促進する

Hsa_circRNA_000166 Promotes Cell Proliferation, Migration and Invasion by Regulating miR-330-5p/ELK1 in Colon Cancer.

• Gang Zhao
• Gong Jian Dai

抄録

序章:

サーキュラーRNA（circRNA）は、ヒト細胞内で広く発現しているノンコーディングRNAの新しいクラスであり、がんの発生や進行に重要な役割を果たしている。本研究の目的は、大腸がん（CC）の発生におけるcirc_000166の役割とそれに関わるシグナル伝達経路を明らかにすることである。

Introduction: Circular RNAs (circRNAs), a novel class of non-coding RNAs, which are widely expressed in human cells, have essential roles in the development and progression of cancers. The aim of this study is to figure out the role of circ_000166 in colon cancer (CC) development and the signaling pathway involved.

材料と方法:

HT29 および HCT116 細胞を circRNA、miRNA ミミックおよび阻害剤の siRNA でトランスフェクトした。細胞増殖、遊走および浸潤を、それぞれCCK-8アッセイおよびトランスウェルアッセイを用いて調べた。ルシフェラーゼレポーターアッセイを用いて、circRNAとmiRNAの標的を検証した。CC細胞をヌードマウスに皮下移植し、腫瘍の成長を検出した。

Materials and Methods: HT29 and HCT116 cells were transfected with siRNA of circRNA, miRNA mimics and inhibitors. Cell proliferation, migration and invasion were examined using CCK-8 assay and transwell assay, respectively. Luciferase reporter assay was used to validate the targets of circRNA and miRNA. CC cells were implanted into nude mice subcutaneously to detect tumor growth.

結果:

hsa_circRNA_000166 は、ヒト CC 組織および CC 細胞株において有意にアップレギュレーションされていました。hsa_circRNA_000166のノックダウンは、インビトロでは細胞の生存率、コロニー形成、遊走および浸潤を減少させ、インビボでは腫瘍の大きさおよび重量を減少させた。ルシフェラーゼレポーターアッセイにより、miR-330-5pがcircRNA_000166の標的であることが明らかになった。miR-330-5pはELK1の3'非翻訳領域（3'UTR）に結合し、ELK1のmRNAとタンパク質発現の両方をダウンレギュレートした。circRNA_000166とmiR-330-5pのデュアルインヒビターは、si-circRNA_000166で誘導された細胞増殖、遊走、浸潤の抑制を抑制した。

Results: hsa_circRNA_000166 was significantly upregulated in the human CC tissue and in the CC cell lines. Knockdown of hsa_circRNA_000166 reduced cell viability, colony formation, migration and invasion in vitro and decreased tumor size and weight in vivo. Luciferase reporter assay revealed that miR-330-5p was the target of circRNA_000166. miR-330-5p could bind to 3' untranslated region (3'UTR) of ELK1 to downregulate both mRNA and protein expression of ELK1. Dual inhibition of circRNA_000166 and miR-330-5p inhibited the suppression of cell proliferation, migration and invasion induced by si-circRNA_000166.

結論:

本研究のデータは、hsa_circRNA_000166がmiR-330-5pをスポンギングすることで遺伝子の発現をアップレギュレートできることを示しており、制御性circRNA/miRNA/mRNAネットワークやCCの病態の理解に貢献する可能性があることを示している。

Conclusion: The data of this study demonstrated that the hsa_circRNA_000166 could upregulated the expression of gene by sponging miR-330-5p, which may contribute to a better understanding of the regulatory circRNA/miRNA/mRNA network and CC pathogenesis.

© 2020 Zhao and Dai.