日本語AIでPubMedを検索
進化するハンタアンウイルスとソウルウイルスの中和特性の変化を疑似ウイルスベースの新しいアッセイで監視する
Monitoring Neutralization Property Change of Evolving Hantaan and Seoul Viruses with a Novel Pseudovirus-Based Assay.
PMID: 32533414 DOI: 10.1007/s12250-020-00237-y.
抄録
ハンタンウイルス（HTNV）とソウルウイルス（SEOV）の変異体は、時間の経過とともに蓄積されてきました。それらの中和エピトープが進化し、それによって現在のワクチンが無力化されたかどうかを判断することが重要である。しかし、従来のプラーク低減中和試験(PRNT)では、大量の変異株が必要となるため、その判定は不可能である。疑似ウイルスベースの中和アッセイ（PBNA）は、HTNVまたはSEOVの糖タンパク質（VSVΔG-HTNVGまたはVSVΔG-SEOVG）に組み込まれた小胞性口内炎ウイルス（VSV）バックボーンを採用することによって開発された。ＨＴＮＶおよびＳＥＯＶの糖タンパク質（ＧＰ）の５６および５１の単一アミノ酸置換を選択し、参照プラスミドに導入した。その後、変異体シュードウイルスを生成し、PBNAにより試験した。PBNAの結果はPRNTの結果と高い相関があり、RはVSVΔG-HTNVGで0.91、VSVΔG-SEOVGで0.82であった。53個のHTNV変異体シュードウイルスと46個のSEOV変異体の生成に成功した。重要なことは、PBNAを使用することで、HTNVまたはSEOV免疫化された抗血清が、対応する53種のHTNV変異体または46種のSEOV変異体のすべてを対照的に中和できることを発見したことです。この新しいPBNAは、進化する多数のHTNVとSEOVに対するワクチンの有効性を綿密に監視することを可能にします。そして、現在のワクチンは、自然発生する突然変異体に対しても有効であることに変わりはありません。
The Hantaan virus (HTNV) and Seoul virus (SEOV) mutants have accumulated over time. It is important to determine whether their neutralizing epitopes have evolved, thereby making the current vaccine powerless. However, it is impossible to determine by using traditional plaque reduction neutralization test (PRNT), because it requires large numbers of live mutant strains. Pseudovirus-based neutralization assays (PBNA) were developed by employing vesicular stomatitis virus (VSV) backbone incorporated with HTNV or SEOV glycoproteins (VSVΔG-HTNVG or VSVΔG-SEOVG). 56 and 51 single amino acid substitutions of glycoprotein (GP) in HTNV and SEOV were selected and introduced into the reference plasmid. Then the mutant pseudoviruses were generated and tested by PBNA. The PBNA results were highly correlated with PRNT ones with R being 0.91 for VSVΔG-HTNVG and 0.82 for VSVΔG-SEOVG. 53 HTNV mutant pseudoviruses and 46 SEOV mutants were successfully generated. Importantly, by using PBNA, we found that HTNV or SEOV immunized antisera could neutralize all the corresponding 53 HTNV mutants or the 46 SEOV mutants respectively. The novel PBNA enables us to closely monitor the effectiveness of vaccines against large numbers of evolving HTNV and SEOV. And the current vaccine remains to be effective for the naturally occurring mutants.