HIV陽性妊婦におけるラミブジン、ジドブジン、ロピナビル、リトナビル血漿中濃度の評価患者の安全性向上のための薬物モニタリングアプリケーション

Assessment of lamivudine, zidovudine, lopinavir, and ritonavir plasma levels in HIV-positive pregnant women: Drug monitoring application to improve patient safety.

• Jessica Hernández-Pineda
• Helgi Helene Jung-Cook
• Norah Lucky Katende-Kyenda
• Norma Galindo-Sevilla
• Mauricio Domínguez-Castro
• José Romo-Yañéz
• Alicia Ramírez-Ramírez
• Claudine Irles
• Ricardo Figueroa-Damián

抄録

妊娠中は、臨床フォローアップ、ウイルス負荷のモニタリング、患者の治療アドヒアランスを向上させるために、抗レトロウイルス剤併用療法（cART）の同時治療薬モニタリング（TDM）が非常に重要である。ヒト免疫不全ウイルス（HIV）陽性妊婦の100μL血漿中のラミブジン（LMV）、ジドブジン（ZDV）、ロピナビル（LPV）、リトナビル（RTV）濃度を同時に測定するために、国内および国際的なガイドラインに準拠した簡易かつ高速な超高速液体クロマトグラフィーとタンデム質量分析法（UPLC-ESI-MS/MS）を開発し、検証した。試料調製には、0.1%ギ酸を用いた低温アセトニトリル中でのタンパク質沈殿を用いた。アセトニトリルとギ酸(0.1%)を用いたグラジエント条件下で、エチレン架橋ハイブリッドC18カラム(2.1"Zs_200A"μm×50"Zs_200A"mm、1.7"Zs_200A"μm)に3μL注入し、ランタイム3.0"Zs_200A"分、3μLでクロマトグラフィー分離を行った。クロマトグラフィー法を用いて、8人のHIV妊婦からの血漿10検体をTDM基準を適用して日常的にフォローアップした。LMV（230.18/112.08）、ZDV（268.22/127.10）、LPV（629.55/447.35）、RTV（721.50/296.20）のプロトン化前駆体/生成物イオン遷移を多重反応モニタリング（MRM）モードで記録した。検量線は、LMV、ZDV、LPVおよびRTVについて、それぞれ50-3,000、75-4,500、250-15,000および25-1,500-ng/mLの範囲で線形であった。精度は97.2％～100.1％、精度は3.4％～12.7％の範囲であった。この方法は、特異度と行列効果値が"Zs_200A"<"Zs_200A"15%であった。最小絶対回収率（%CV）は、LMV、ZDV、LPV、RTVについて、それぞれ90.5（5.4）、90.8（5.0）、95.4（3.5）、93.7（6.9）でした。患者サンプル中の薬物濃度は、ZDV、LMV、LPV、RTVでそれぞれ91.98%、77.54%、53.80%、92.16%と高い個人差がありました。また，8例中2例は血漿中にプロテアーゼ阻害剤（PI）が検出されず，アドヒアランスが認められなかった。本手法は，治療薬モニタリングに有効であることが示され，特にHIV陽性妊婦の集団薬物動態学への応用が期待されている。

Simultaneous therapeutic drug monitoring (TDM) of combination antiretroviral therapy (cART) is critical during pregnancy in order to improve clinical follow-up, monitor viral load, and patient adherence to treatment.A modified simple and fast ultra-high performance liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry and electrospray ionization (UPLC-ESI-MS/MS) method was developed and validated according to national and international guidelines for the simultaneous determination of lamivudine (LMV), zidovudine (ZDV), lopinavir (LPV), and ritonavir (RTV) concentrations in 100-μL plasma sample of Human Immunodeficiency Virus (HIV)-positive pregnant women. Protein precipitation using 0.1% formic acid in cold acetonitrile was used for sample preparation. The chromatographic separation was achieved with a run-time of 3.0 minutes and 3-μL injection on an ethylene bridged hybrid C18 column (2.1 μm × 50 mm, 1.7 μm), under gradient conditions using acetonitrile and formic acid (0.1%).The chromatographic method was used to analyze 10 plasma samples from 8 HIV pregnant women as a clinical patient routinely follow-up by applying TDM criteria.The protonated precursor/product ion transitions for LMV (230.18/112.08), ZDV (268.22/127.10), LPV (629.55/447.35), and RTV (721.50/296.20) were recorded in multiple-reaction-monitoring (MRM) mode. The calibration curve was linear in the range of 50-3,000, 75-4,500, 250-15,000, and 25-1,500-ng/mL for LMV, ZDV, LPV, and RTV, respectively. The range of accuracy was 97.2% to 100.1% and precision 3.4% to 12.7%. The method showed specificity and matrix effect values of < 15%. Minimum absolute recovery percentages (%CV) were 90.5 (5.4), 90.8 (5.0), 95.4 (3.5), and 93.7 (6.9), for LMV, ZDV, LPV, and RTV, respectively. Drug concentrations in patient samples had high inter-individual variability with %CV of 91.98%, 77.54%, 53.80%, and 92.16% for ZDV, LMV, LPV, and RTV, respectively. Two of the 8 patients showed no adherence due to the absence of Protease Inhibitors (PIs) levels in plasma.This technique demonstrated to be effective in therapeutic drug monitoring and is intended to be used in population pharmacokinetics specifically for HIV-positive pregnant women.