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パラコクシディオイデス・ブラジレンシスにおけるHsp60の発現とその細胞位置
Expression of Hsp60 and its cell location in Paracoccidioides brasiliensis.
PMID: 32401956 PMCID: PMC7232959. DOI: 10.1590/s1678-9946202062029.
抄録
パラコクシディオイデス種は，ブラジルで流行している全身性真菌症であるパラコクシディオイデス真菌症（PCM）の原因菌であり，その治療にはいくつかの課題がある．PCMの治療法には、マウス感染実験で保護を誘導する免疫原性抗原であるP. brasiliensis 60-kDa-heat-shock protein（PbHsp60）など、新たな治療法やワクチンターゲットの研究が必要となる課題があります。ここでは、P. brasiliensisの異なる形態型および形態移行期におけるP. brasiliensisにおけるPbHsp60のmRNAの相対的な発現を調べた。さらに、rPbHsp60に対する抗体を作製し、これを用いて酵母やハイパーにおけるPbHsp60の位置を電子顕微鏡で解析した。解析の結果、酵母では菌糸体と比較してHSP60 mRNAの相対量が大幅に増加し、移行期では中間的な発現が見られた。細胞内での位置については、免疫電子顕微鏡解析の結果、PbHsp60は細胞壁内に存在していることが明らかになった。これらの結果から、このタンパク質は細胞壁の維持や宿主との相互作用に関与している可能性が示唆されました。
Paracoccidioides species cause paracoccidioidomycosis (PCM), a systemic mycosis highly prevalent in Brazil. Therapy of PCM has some issues that make studies for new therapeutic and vaccine targets relevant, such as the P. brasiliensis 60-kDa-heat-shock protein (PbHsp60), an immunogenic antigen that induces protection in experimental mice infection. Here, we investigated the relative expression of mRNA for PbHsp60 in P. brasiliensis in the different morphotypes of P. brasiliensis and in morphological transition phases. In addition, antibodies to rPbHsp60 were produced and used to analyze the location of PbHsp60 in yeast and hyphae by electron microscopy. The analyses showed a substantial increase in the relative amounts of HSP60 mRNA in yeast when compared to mycelium and an intermediate expression in transitional forms. Regarding the cell location, immunoelectron microscopy analysis revealed that PbHsp60 is within the cell wall. These observations suggest that this protein may be involved in the maintenance of the cell wall integrity and the interaction with the host for colonization, infection and pathogenesis.