日本語AIでPubMedを検索
固体NMR分光のための磁気的に配列されたリン脂質ポリマーディスク内の膜タンパク質
Membrane proteins in magnetically aligned phospholipid polymer discs for solid-state NMR spectroscopy.
PMID: 32371072 DOI: 10.1016/j.bbamem.2020.183333.
抄録
十分に水和されたリン脂質二重層は、膜タンパク質のためのほぼネイティブな環境を提供します。これにより、NMRや他の分光実験に適した化学的に定義されたサンプルの調製が可能となり、タンパク質の構造、ダイナミクス、機能的相互作用を原子分解能で明らかにすることができます。合成高分子であるスチレンマレイン酸（SMA）は、室温で直径30nm以上のマクロディスクを形成し、35℃以上の温度でNMR分光器の磁場中で自発的に配向する無洗浄試料を調製することができます。ここでは、磁気的に整列したマクロディスクが膜タンパク質の固体NMR実験に特に適していることを示しています。我々は、広い範囲のサイズとトポロジカルな複雑さを持つ4つの異なる膜タンパク質を組み込んだ整列したマクロディスクが、高分解能のOS固体状態NMRスペクトルをもたらすことを示しています。本研究は、膜および膜タンパク質生物物理学の分野に重要な貢献をしたMichelle Auger氏に捧げられます。
Well-hydrated phospholipid bilayers provide a near-native environment for membrane proteins. They enable the preparation of chemically-defined samples suitable for NMR and other spectroscopic experiments that reveal the structure, dynamics, and functional interactions of the proteins at atomic resolution. The synthetic polymer styrene maleic acid (SMA) can be used to prepare detergent-free samples that form macrodiscs with diameters greater than 30 nm at room temperature, and spontaneously align in the magnetic field of an NMR spectrometer at temperatures above 35 °C. Here we show that magnetically aligned macrodiscs are particularly well suited for solid-state NMR experiments of membrane proteins because the SMA-lipid assembly both immobilizes the embedded protein and provides uniaxial order for oriented sample (OS) solid-state NMR studies. We show that aligned macrodiscs incorporating four different membrane proteins with a wide range of sizes and topological complexity yield high-resolution OS solid-state NMR spectra. The work is dedicated to Michelle Auger who made key contributions to the field of membrane and membrane protein biophysics.
Copyright © 2020. Published by Elsevier B.V.