長期的な肺合併症を有するイオウマスタード被曝者の肺組織におけるLTBP1およびSmad6遺伝子発現の評価

Evaluation of the LTBP1 and Smad6 Genes Expression in Lung Tissue of Sulfur Mustard-exposed Individuals with Long-term Pulmonary Complications.

• Somaye Mami
• Sara Ghaffarpour
• Soghrat Faghihzadeh
• Tooba Ghazanfari

抄録

硫黄マスタード（SM）への暴露は、肺などの様々な臓器を損傷し、短期的・長期的な合併症を引き起こす。 形質転換成長因子β（TGF-β）は、気道リモデリングに関連する線維芽細胞の活動を変化させる主な役割を持っている。遅延TGFβ結合タンパク質1（LTBP1）は、細胞外マトリックスにおけるTGF-βの局在化を促進する。また、Mother against decapentapentaplegic homolog 6 (Smad6)はTGF-βシグナル伝達をネガティブに制御し、主な負のフィードバックループを確立しています。本研究では、SM暴露者と対照者の肺組織におけるLTBP1とSmad6の発現を調べた。肺ホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）ブロックは、いくつかの総合病院の古生物病理部から SM 被験群（20 サンプル）と対照群（20 サンプル）の肺ホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）ブロックを採取した。肺FFPE組織の全mRNAを抽出した。抽出したmRNAの品質をAgilent Bioアナライザーで評価し、ナノドロップを用いてRNAを定量した。LTBP1およびSmad6の発現レベルをリアルタイムPCRで評価した。LTBP1の発現量は両群間で変化しなかったが（p=0.626），Smad6の発現量は対照群と比較して有意に高い（2.6倍）ことがわかった（p=0.001）．これらの結果から、Smad6は肺組織のリモデリングに関与している可能性が示唆された。Smad6は肺組織の線維化を制御しており、TGF-βの負のフィードバック機構として機能していることが示唆された。

Sulfur mustard (SM) exposure injures different organs such as the lungs and leads to short and long term complications Transforming growth factor beta (TGF-β) has the main role in altering fibroblast activities linked to airways remodeling. Latency TGF beta binding proteins 1 (LTBP1 facilitates localization of TGF-β in the extracellular matrix. Mothers against decapentaplegic homolog 6 (Smad6) negatively regulates TGF-β signaling, thus establishing a main negative feedback loop. In this study, we investigated the expression of LTBP1 and Smad6 in the lung tissues of SM-exposed and control individuals. Lung formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) blocks of SM-exposed (20 samples) and control groups (20 samples) were collected from archival pathology department of several general hospitals. The total mRNA of lung FFPE tissues was extracted. Quality of the extracted mRNA was evaluated by an Agilent Bio analyzer and RNA was quantified using a Nano Drop. LTBP1 and Smad6 expression levels were evaluated by real-time PCR. LTBP1 expression levels did not change between the two groups (p=0.626), howeverSmad6 expression levels were significantly higher (2.6 fold) in SM-exposed individuals compared to the control group (p=0.001). Our results revealed that Smad6 may be involved in lung tissue remodeling process in SM-exposed patients. Smad6 regulates fibrotic alterations in lung tissue and its function as negative feedback mechanisms in TGF-β.