アガロースゲルとミドリガメからのプラズマを使用した毛包帯電気泳動法の比較（）

COMPARISON OF AGAROSE GEL AND CAPILLARY ZONE ELECTROPHORESIS METHODS USING PLASMA FROM GREEN TURTLES ().

• Madison Toonder
• Justin R Perrault
• Carolyn Cray

抄録

アガロースゲル電気泳動（AGE）は、広く獣医学全体で、鳥類や爬虫類種の血漿タンパク質の分析のために実装されています。キャピラリーゾーン電気泳動（CZE）はヒトの臨床病理検査室では標準的な方法になりつつありますが、動物サンプルの分析にはあまり使われていませんでした。本研究の目的は、アオウミガメ（）の血漿を用いて、AGE法とCZE法から得られたタンパク質画分を比較することであった。血漿サンプルはメーカーのガイドラインに沿って AGE 法と CZE 法で分析した。両法はCV分析、スピアマンの相関、Passing-Bablok回帰、Bland Altmanプロットによって評価されました。CZEは一貫してAGEよりも多くの分画を分離しており、AGEでは3つの分画がプレアルブミンの移動領域で、AGEでは1つの分画が、γグロブリンの領域では2つの分画が、AGEでは1つの分画が観測されました。AGEと比較して、CZEはアッセイ内試験で低いCV（1.0-4.9% vs 2.0-28.3%）を示し、アッセイ間試験では低いCVまたは重複するCV（1.0-10.6 vs 2.3-22.0）を示しました。プレアルブミン、α2グロブリンおよびβグロブリン画分は、方法間で最も相関が少なかった（3つの画分すべてについて：≤0.28、>0.21）。アルブミン（=0.78, <0.0001）とγグロブリン（=0.78, <0.0001）については、AGE法とCZE法の間に中程度の有意な相関が観察されました。CZEはAGEよりも高い精度と使いやすさを持っており、追加のタンパク質画分を解決する機会を提供します。そのためには、分画の区切りの配置、種特異的な基準間隔の定義、異常なカメにおける臨床的有用性の評価における新たな規約の開発が必要となります。

Agarose gel electrophoresis (AGE) has been widely implemented throughout veterinary medicine and for analysis of plasma proteins of avian and reptile species. Capillary zone electrophoresis (CZE) is becoming a standard method in human clinical pathology laboratories but has not widely been used for the analysis of animal samples. The objective of the present study was to compare protein fractions derived from AGE and CZE methods using plasma from the green turtle (). Plasma samples were analyzed by AGE and CZE per manufacturer guidelines. The methods were assessed by CV analysis, Spearman's correlation, Passing-Bablok regression, and Bland Altman plots. CZE consistently resolved more fractions than AGE with three fractions observed in the prealbumin migrating region versus one for AGE and two fractions in the γ globulin region versus one for AGE. Compared with AGE, CZE showed a lower CV in intra-assay tests (1.0-4.9% vs 2.0-28.3%) and a lower or overlapping CV in interassay tests (1.0-10.6 vs 2.3-22.0). The prealbumin, α2 globulin, and β globulin fractions correlated the least between the methods (for all three fractions: ≤ 0.28, > 0.21). Moderate, significant correlations between AGE and CZE methods were observed for albumin ( = 0.78, < 0.0001) and γ globulins ( = 0.78, < 0.0001). CZE has a higher precision and ease of use over AGE and offers the opportunity to resolve additional protein fractions. This will necessitate the development of new conventions in placement of fraction delimits, definition of species-specific reference intervals, and evaluation of clinical utility in abnormal turtles.