形態学的品質基準を用いたクローン化されたメキシコオオツノヒツジ胚の発生ダイナミクス

Developmental dynamics of cloned Mexican bighorn sheep embryos using morphological quality standards.

• Sarahí Hernández Martínez
• José E Hernández Pichardo
• José R Vazquez Avendaño
• Demetrio Alonso Ambríz García
• María Del Carmen Navarro Maldonado

抄録

クローン化したメキシコオオツノヒツジ（Ovis canadensis mexicana）の胚の発生動態を形態学的品質基準に基づいて評価した。基準によって決定されたカテゴリーは、胚発生段階、核数、生存率と相関していた。その結果、実験群（クローン化されたメキシコ産オオツノヒツジ胚）と対照群（国内産羊胚）の間で胚盤胞率に差はなく（p>.05）、一方、IV型断片化はクローンの方が高かった（p<.05）。基準は、培養24時間後に少なくとも1回分裂した胚、または断片化した胚の同定を可能にした。胚の品質は時間の経過とともに低下し、96hrは胚の最終的な形態学的品質を予測するのに理想的な時間点となりました。モルレと胚盤胞の核染色では、胚の質が高いほど正常で生存可能な胚盤胞の割合が高いことが示された。この評価基準により、クローン化されたメキシコオオツノヒツジの胚の動態、ステージ、品質を高い信頼性で記述することができた。さらに、断片化、多核化、ブロッキングを含む発生異常を同定した。

The developmental dynamics of cloned Mexican bighorn sheep (Ovis canadensis mexicana) embryos were evaluated based on morphological quality standards. Categories determined by standards were correlated with the embryonic development stage, number of nuclei and viability. The results showed no differences in the blastocyst rate between the experimental (cloned Mexican bighorn sheep embryos) and control (parthenogenetic domestic sheep embryos) groups (p > .05), while type IV fragmentation was higher in clones (p < .05). The standards allowed for the identification of embryos that divided at least once or fragmented after 24 hr of culture. The highest percentage of morulae appeared at 96 hr, the final stages of development: nonsegmented, blocked, fragmented and blastocysts appeared at 192 hr. Embryonic quality decreased over time, making 96 hr the ideal time point to predict the final morphological quality of embryos. Nuclear staining of the morulae and blastocysts showed that higher embryo quality was associated with a higher percentage of normal and viable blastomeres. The evaluated criteria allowed for descriptions of the dynamics, stage and quality of cloned Mexican bighorn sheep embryos with a high degree of reliability. In addition, developmental anomalies, including fragmentation, multinucleation and blocking, were identified.

© 2020 The Authors. Veterinary Medicine and Science Published by John Wiley & Sons Ltd.