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姉妹染色体交換(SCE)アッセイ
The Sister Chromatid Exchange (SCE) Assay.
PMID: 31989571 DOI: 10.1007/978-1-0716-0223-2_25.
抄録
培養細胞における姉妹染色体交換を検出するための完全に最適化された染色法を紹介します。この方法では、再現性の高いロバストな定量結果が得られます。姉妹染色体交換は、遺伝毒性や細胞の相同組換えの基礎となる生化学的変化を検出するための古典的な毒物学的アッセイ法である。5'-ブロモデオキシウリジンの存在下で2回のDNA複製のために細胞を成長させ、スライドガラス上のメタフェーススプレッドを収集し、UV感受性染料Hoechst 33258で処理し、長波長のUV光に曝露し、Giemsa染色することで、交換の永久的な記録を得ることができます。
A fully optimized staining method for detecting sister chromatid exchanges in cultured cells is presented. The method gives reproducibly robust quantitative results. Sister chromatid exchange is a classic toxicology assay for genotoxicity and for detecting alterations to the biochemistry underlying cellular homologous recombination. Growth of cells in the presence of 5'-bromo-deoxyuridine for two rounds of DNA replication followed by collecting metaphase spreads on glass slides, treatment with the UV-sensitive dye Hoechst 33258, long-wave UV light exposure, and Giemsa staining gives a permanent record of the exchanges.