真核細胞開始因子3Bの阻害は慢性骨髄性白血病細胞の増殖を抑制し、アポトーシスを促進する

Inhibition of eukaryotic initiation factor 3B suppresses proliferation and promotes apoptosis of chronic myeloid leukemia cells.

• Laiquan Huang
• Kun He
• Jianxin Wang
• Jiawei Yan
• Yizhi Jiang
• Zhongling Wei
• Jun Zhang
• Guangxi Li
• Lili Sheng

抄録

背景:

真核生物の翻訳開始因子 3B（eIF3b）は、大腸がん、膀胱がん、前立腺がん、膠芽腫などで過剰発現していることが報告されていますが、慢性骨髄性白血病（CML）では細胞増殖やアポトーシスとの相関は報告されていません。しかし、慢性骨髄性白血病（CML）におけるeIF3b遺伝子発現と細胞増殖・アポトーシスとの相関関係については報告がありません。

BACKGROUND: Eukaryotic translation initiation factor 3B (eIF3b) has been reported to be overexpressed in colon, bladder and prostate cancers as well as in glioblastoma. However, there is no report on any correlation of eIF3b gene expression with cell proliferation and apoptosis in chronic myeloid leukemia (CML).

目的:

本研究では、CMLにおける細胞増殖およびアポトーシスにおけるeIF3bの役割を評価した。

OBJECTIVES: In this study, we evaluated the role of eIF3b in cell proliferation and apoptosis in CML.

材料と方法:

CML患者およびCML細胞株からのサンプルを使用した。定量的 RT-PCR、siRNA トランスフェクション、フローサイトメトリー、ウエスタンブロット解析を行った。

MATERIAL AND METHODS: Samples from patients with CML and CML cell lines were used. Quantitative RT-PCR, siRNA transfection, flow cytometry, and western blot analysis were performed.

結果:

定量的 RT-PCR により、CML 患者の eIF3b mRNA の発現は非悪性対照群よりも高いことが明らかになった。CML細胞の増殖は、siRNAをトランスフェクションした後に減少した。実験群では、トランスフェクション後にG1期とS期の細胞の割合が減少したが、対照群と比較してG2/M期の細胞数が増加した。トランスフェクション後の全細胞アポトーシスの割合は、sheIF3b群（K562細胞にレンチウイルス-抗eIF3bを導入）の方が、shCtrl群（K562細胞に空ベクターレンチウイルスを導入）よりも高かった。トランスフェクション後のカスパーゼ3/7活性が高く、抗アポトーシスタンパク質BCL-2の発現はshCtrl群よりもsheIF3b群の方が低かった。

RESULTS: Quantitative RT-PCR revealed that the expression of eIF3b mRNA in CML patients was higher than that in the non-malignant controls. The proliferation of CML cells decreased after transfection of the cells with siRNA. The proportion of cells in the G1 and S phases in the experimental group decreased after transfection, while the number of cells in the G2/M phase increased, as compared with the control group. The total cell apoptosis percentage in the sheIF3b group (transduction with lentivirus-anti-eIF3b in K562 cells) was higher than the shCtrl group (transduction with empty-vector lentivirus in K562 cells) after transfection. Caspase 3/7 activity was higher and the expression of anti-apoptotic protein BCL-2 was lower in the sheIF3b group than in the shCtrl group after transfection.

結論:

その結果、eIF3b 発現のダウンレギュレーションは、CML 細胞の増殖を抑制し、アポトーシスを誘導することが示唆された。

CONCLUSIONS: Our results suggest that downregulation of eIF3b expression inhibits proliferation and induces apoptosis in CML cells.