エクソソソームMiR-744は、PAX2を標的とした肝細胞癌の増殖とソラフェニブ化学抵抗性を抑制する

Exosomal MiR-744 Inhibits Proliferation and Sorafenib Chemoresistance in Hepatocellular Carcinoma by Targeting PAX2.

• Guanghui Wang
• Wei Zhao
• Huxia Wang
• Guanglin Qiu
• Zhengdong Jiang
• Guangbing Wei
• Xuqi Li

抄録

背景 肝細胞がん（HCC）は一般的に発生する肝悪性腫瘍である。その予後は未だ満足のいくものではありません。蓄積されたエビデンスから、エクソソソームマイクロRNA（miRNA）がバイオマーカーとして機能し、肝細胞がんの進行に重要な役割を果たしていることが明らかになってきた。本研究では、エクソソソームmiR-744のHCCにおける生物学的役割とその基盤となるメカニズムを明らかにした。本研究では、ヒト幹細胞を用いて、ヒト幹細胞を用いて、ヒト幹細胞を用いて、ヒト幹細胞を用いて、ヒト幹細胞を用いて、ヒト幹細胞を用いて、ヒト幹細胞を用いて、ヒト幹細胞を用いて、ヒト幹細胞の発現を解析した。その結果、HCCの組織、細胞株、血清エクソソームにおけるmiR-744の発現を定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（qRT-PCR）により検出した。EdU（5-エチニル-2'-デオキシウリジン）アッセイおよびCell Counting Kit-8（CCK-8）アッセイを行い、HepG2細胞におけるmiR-744またはエキソソソームmiR-744の増殖およびソラフェニブ抵抗性への影響を示した。また、HepG2 細胞における miR-744 のレベルを調節することにより、miR-744 の標的を確認した。結果 HCC の組織や細胞株、患者血清由来のエクソソームや HepG2 細胞では、miR-744 がダウンレギュレートされていた。さらに、ダウンレギュレートされたmiR-744はHepG2細胞の増殖を促進し、HepG2細胞のソラフェニブに対する化学感受性を抑制した。PAX2はmiR-744の機能的標的として同定された。興味深いことに、miR-744はソラフェニブ耐性HepG2細胞由来のエクソソームで減少していた。さらに、miR-744 を濃縮したエクソソームで処理すると、HepG2 細胞の増殖が有意に抑制され、ソラフェニブ耐性が低下した。結論 MiR-744はHCCの増殖と化学抵抗性に必須の役割を持っている。血清エクソソソームmiR-744はHCCのバイオマーカーとして機能する可能性があり、エクソソソームmiR-744はHCC治療のための革新的な戦略を提供する可能性がある。

BACKGROUND Hepatocellular carcinoma (HCC) is a commonly occurring liver malignancy. Its prognosis remains unsatisfactory. Accumulating evidence has revealed that exosomal microRNAs (miRNAs) act as biomarkers and play crucial roles in the advancement of HCC. The current study explored the biological role and fundamental mechanism of exosomal miR-744 in HCC. MATERIAL AND METHODS The serum exosomes of HCC patients were isolated by differential ultracentrifugation. MiR-744 expression in HCC tissues, cell lines and serum exosomes were detected by quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR). EdU (5-ethynyl-2'-deoxyuridine) assay and Cell Counting Kit-8 (CCK-8) assay were conducted to show the impacts of miR-744 or exosomal miR-744 on proliferation and sorafenib resistance in HepG2 cells. The target of miR-744 was ascertained by regulating the level of miR-744 in HepG2 cells. RESULTS MiR-744 is downregulated in HCC tissues and cell lines as well as in exosomes derived from patient serum and HepG2 cells. Additionally, downregulated miR-744 promotes HepG2 cell proliferation and inhibits the chemosensitivity of HepG2 cells to sorafenib. PAX2 was identified as the functional target of miR-744. Interestingly, miR-744 is decreased in exosomes derived from sorafenib-resistant HepG2 cells. Furthermore, when treated with the miR-744-enriched exosomes, the proliferation of HepG2 cells was significantly suppressed, and the sorafenib resistance was reduced. CONCLUSIONS MiR-744 has an imperative role in the propagation and chemoresistance of HCC. Serum exosomal miR-744 might act as a biomarker of HCC, and exosomal miR-744 might offer an innovative strategy for HCC treatment.