LncRNA TNK2-AS1 は、miR-150-5p をスポンギングすることにより、VEGFA と FGF1 の発現を調節し、HASMC の増殖と遊走を制御した

LncRNA TNK2-AS1 regulated ox-LDL-stimulated HASMC proliferation and migration via modulating VEGFA and FGF1 expression by sponging miR-150-5p.

• Tianzhi Cai
• Xiuzhen Cui
• Kelin Zhang
• Anji Zhang
• Baixue Liu
• Jian-Jun Mu

抄録

長鎖非コードRNA（lncRNA）は、心血管疾患の制御に重要な役割を果たしていることが示唆されている。本研究では、酸化低密度リポ蛋白質（ox-LDL）を刺激したヒト大動脈平滑筋細胞（HASMCs）における lncRNA TNK2 アンチセンス RNA 1（TNK2-AS1）の発現を決定し、HASMCs の増殖・遊走における TNK2-AS1 の機構的役割を検討した。その結果、ox-LDLはHASMCの増殖と遊走を促進し、ox-LDLで処理したHASMCの増殖と遊走はTNK2-AS1のアップレギュレーションを伴っていることが明らかになった。また、TNK2-AS1 のノックダウンは ox-LDL 刺激を受けた HASMC の細胞増殖と遊走を抑制し、TNK2-AS1 の過剰発現は HASMC の増殖と遊走を促進することが示された。また、TNK2-AS1は競合内因性RNA（ceRNA）として作用することでmiR-150-5pの発現を逆制御しており、TNK2-AS1過剰発現によるHASMCの増殖・遊走抑制効果はmiR-150-5p過剰発現によって低下した。さらに、miR-150-5pは血管内皮増殖因子A（VEGFA）および線維芽細胞増殖因子1（FGF1）の3'未翻訳領域を標的とし、HASMCにおけるFGF1およびVEGFAの発現を調節することができ、ox-LDL刺激を受けたHASMCにおけるmiR-150-5p過剰発現の抑制効果は、VEGFAおよびFGF1の発現を強制することで減衰した。また、TNK2-AS1 のノックダウンにより誘導された細胞増殖・遊走抑制効果は、VEGFA および FGF1 のノックダウンにより部分的に回復し、TNK2-AS1 の過剰発現による HASMC の増殖・遊走抑制効果は VEGFA および FGF1 のノックダウンにより減少した。以上の結果から、TNK2-AS1 は、VEGFA および FGF1 の発現を調節し、miR-150-5p の ceRNA として作用することで、ox-LDL 刺激を受けた HASMC に作用していることが明らかになった。

Long non-coding RNAs (lncRNAs) have been indicated for the regulatory roles in cardiovascular diseases. This study determined the expression of lncRNA TNK2 antisense RNA 1 (TNK2-AS1) in oxidized low-density lipoprotein (ox-LDL)-stimulated human aortic smooth muscle cells (HASMCs) and examined the mechanistic role of TNK2-AS1 in the proliferation and migration of HASMCs. Our results demonstrated that ox-LDL promoted HASMC proliferation and migration, and the enhanced proliferation and migration in ox-LDL-treated HASMCs were accompanied by the up-regulation of TNK2-AS1. In vitro functional studies showed that TNK2-AS1 knockdown suppressed cell proliferation and migration of ox-LDL-stimulated HASMCs, while TNK2-AS1 overexpression enhanced HASMC proliferation and migration. Additionally, TNK2-AS1 inversely regulated miR-150-5p expression via acting as a competing endogenous RNA (ceRNA), and the enhanced effects of TNK2-AS1 overexpression on HASMC proliferation and migration were attenuated by miR-150-5p overexpression. Moreover, miR-150-5p could target the 3' untranslated regions of vascular endothelial growth factor A (VEGFA) and fibroblast growth factor 1 (FGF1) to regulate FGF1 and VEGFA expression in HASMCs, and the inhibitory effects of miR-150-5p overexpression in ox-LDL-stimulated HASMCs were attenuated by enforced expression of VEGFA and FGF1. Enforced expression of VEGFA and FGF1 also partially restored the suppressed cell proliferation and migration induced by TNK2-AS1 knockdown in ox-LDL-stimulated HASMCs, while the enhanced effects of TNK2-AS1 overexpression on HASMC proliferation and migration were attenuated by the knockdown of VEGFA and FGF1. Collectively, our findings showed that TNK2-AS1 exerted its action in ox-LDL-stimulated HASMCs via regulating VEGFA and FGF1 expression by acting as a ceRNA for miR-150-5p.

© 2019 The Authors. Journal of Cellular and Molecular Medicine published by John Wiley & Sons Ltd and Foundation for Cellular and Molecular Medicine.