miR-638はE2F2を標的にして乳がん細胞の幹細胞特性を抑制する

miR-638 represses the stem cell characteristics of breast cancer cells by targeting E2F2.

• Qiu-Yan Lin
• Jia-Qi Wang
• Li-Li Wu
• Wei-E Zheng
• Pei-Rui Chen

抄録

目的:

miR-638は腫瘍抑制因子として作用し、E2F転写因子2（E2F2）は一部のがんでは重要な制御因子であるが、乳がん幹細胞の幹細胞化におけるmiR-638とE2F2の役割はほとんど詳細に解明されていない。そこで私たちは、miR-638とE2F2がBCSCsの幹細胞の幹細胞化に及ぼす影響を調べることに着目しました。

OBJECTIVE: The miR-638 acted as a tumor suppressor and E2F transcription factor 2 (E2F2) was a critical regulator in some cancers, while the role of them on stemness of breast cancer stem cells (BCSCs) was rarely detailed. Hence, we focused on exploring the effects of miR-638 and E2F2 on BCSCs stemness.

方法:

BCSCのCD24-/CD44+細胞の割合をフローサイトメトリーで検出した。miR-638とE2F2の標的関係をルシフェラーゼアッセイを用いて探索した。BCSCの自己複製、増殖、浸潤の能力は、マムスフィア形成、Cell Counting Kit-8 (CCK-8)、コロニー形成、トランスウェルアッセイを用いて決定した。miR-638の腫瘍成長への影響を検出するために、ゼノグラフト腫瘍を樹立した。

METHODS: The proportion of CD24 -/CD44 + cells of BCSCs was detected by flow cytometry. The target relationship of miR-638 and E2F2 was explored using luciferase assays. The ability of self-renewal, proliferation, and invasion of BCSCs were determined by Mammosphere forming, Cell Counting Kit-8 (CCK-8), colony formation, and transwell assays. Xenograft tumor was established to detect the influence of miR-638 on tumor growth.

結果:

miR-638はダウンレギュレーションされていたが、乳癌ではE2F2が上昇していた。E2F2レベルはmiR-638と負の相関があった。BCSCはCD24/CD44+細胞の割合が高く、性決定領域Y-box 2（SOX2）とオクタマー結合転写因子4（OCT4）のレベルが高かった。BCSCではmiR-638がダウンレギュレートされ、E2F2が増加した。miR-638はE2F2を標的とすることができ、BCSCs細胞ではE2F2のレベルを低下させた。miR-638の過剰発現は、E2F2を阻害することで、CD24/CD44+細胞の割合を減少させ、SOX2とOCT4のレベルを低下させた。また、miR-638の過剰発現は、E2F2を阻害することにより、BCSCの自己複製、増殖、浸潤の能力を抑制した。また、miR-638の過剰発現は乳房腫瘍の増殖を抑制した。

RESULTS: miR-638 was down-regulated, while E2F2 was elevated in breast cancer. The E2F2 level was negatively correlated with miR-638. The BCSCs represented higher proportion of CD24 -/CD44 + cells and levels of sex determining region Y-box 2 (SOX2) and octamer-binding transcription factor 4 (OCT4). The miR-638 was down-regulated and E2F2 was increased in BCSCs. MiR-638 could target to E2F2 and decreased the level of E2F2 in BCSCs cells. Overexpression of miR-638 decreased the proportion of CD24 -/CD44 + cells and the levels of SOX2 and OCT4 by inhibiting E2F2. The overexpression of miR-638 also inhibited the abilities of self-renewal, proliferation, and invasion of BCSCs by inhibiting E2F2. The miR-638 overexpression inhibited the breast tumor growth.

結論:

MiR-638はE2F2を標的にしてBCSCの特徴や行動を抑制する。MiR-638は乳がん治療のターゲットとなる可能性がある。

CONCLUSION: MiR-638 represses the characteristics and behaviors of BCSCs by targeting E2F2. MiR-638 may be a potential target for breast cancer therapy.