Dp71欠損したHBE細胞は、HOによりDNA損傷とアポトーシスの増加を示した

Dp71 depleted HBE cells displayed increased DNA damage and apoptosis induced by HO.

• Sichuang Tan
• Shuai Zhao
• Xuefei Xiao
• Lan Xiao
• Jinliang Xie
• Sipin Tan

抄録

Dp71 siRNAプラスミドを安定的にトランスフェクトしたヒト気管支上皮(HBE)-Dp71アンチセンス(AS)細胞を調製し、PC12以外の細胞におけるDp71の生物学的形質のさらなる研究を行った。HBE-Dp71AS細胞は、HOによって誘導されるDNA損傷の増加を示した。HBE-Dp71AS細胞のアポトーシスは、カスパーゼ3, カスパーゼ8, カスパーゼ9を介して増加した。また、HBE-Dp71AS細胞は増殖とクローン形成の低下を示した。また、RAD51がDp71の新たな結合パートナーであることが、共免疫沈降法（Ip）と免疫蛍光法により明らかになった。HBE-Dp71AS細胞では、RAD51のmRNAとタンパク質レベルの低下が観察された。HBE-Dp71AS細胞ではLamin B1、focal adhesion kinase (FAK)、phosphorylated focal adhesion kinase (p-FAK)、phosphorylated protein kinase B (p-AKT)の減少が検出され、RAD51とともにHBE-Dp71AS細胞の性格変化の分子的説明として機能していることがわかった。

Human bronchial epithelium (HBE)-Dp71 anti-sense(AS)cells with stably transfected Dp71 siRNA plasmids were prepared for further exploration of Dp71 biological traits in cells other than PC12. HBE-Dp71AS cells displayed increased DNA damage induced by HO. Apoptosis of HBE-Dp71AS cells induced by HO was increased via enhancing caspase 3, caspase 8 and caspase 9. HBE-Dp71AS cells also displayed decreased proliferation and clonogenic formation. RAD51 was proved to be a new binding partner of Dp71 by co-immunoprecipitation (Ip) and immunofluorescence. Reduced RAD51 mRNA and protein levels were observed in HBE-Dp71AS cells. Decreased lamin B1, focal adhesion kinase (FAK), phosphorylated focal adhesion kinase (p-FAK) and phosphorylated protein kinase B (p-AKT) were detected in the HBE-Dp71AS cells, which functioned together with RAD51 as the molecular explanations for the character alterations of HBE-Dp71AS cells.