豚2',5'-オリゴアデニル酸合成酵素1bの分子クローニングと機能特性、および豚生殖呼吸器症候群ウイルス感染に対するその効果

Molecular cloning and functional characterization of porcine 2',5'-oligoadenylate synthetase 1b and its effect on infection with porcine reproductive and respiratory syndrome virus.

• Ruining Wang
• Yinfeng Kang
• Huawei Li
• Hongfang Ma
• Wenjia Wang
• Yanfen Cheng
• Pengchao Ji
• Erqin Zhang
• Mengmeng Zhao

抄録

豚の生殖呼吸器症候群ウイルス（PRRSV）は、豚の2'-5'-オリゴアデニル酸合成酵素（OAS）1aの発現を増加させることが以前に示されているが、PRRSVの複製における豚のOAS1b（pOAS1b）の具体的な役割は不明である。本研究では、ブタのOAS1b遺伝子の配列解析を行い、その過剰発現またはサイレンシングがPRRSV複製に及ぼす影響を調べた。OAS1bは主に細胞質に局在しており、P-LoopやD-Boxなどの保存されたタンパク質ドメインを含んでいることから、ヌクレオチジル転移酵素活性は完全であり、抗ウイルス効果はリボヌクレアーゼL（RNase L）に依存していることが示唆された。OAS1bの過剰発現はPRRSVの複製を抑制したが，OAS1bの小干渉RNAサイレンシングはウイルス力価の上昇をもたらした．さらに、OAS1bはインターフェロンの発現を促進し、インターフェロン-βプロモーター活性を促進した。これらの結果は、新しい抗PRRSV戦略の開発に向けた理論的基礎を築くものである。

Porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) has previously been shown to increase porcine 2'-5'-oligoadenylate synthase (OAS) 1a expression, but the specific role of porcine OAS1b (pOAS1b) in PRRSV replication remains unknown. In this study, we conducted sequence analysis of the porcine OAS1b gene and studied the effects of its overexpression or silencing on PRRSV replication. OAS1b, localized mainly in the cytoplasm, was found to contain conserved protein domains, such as the P-Loop and D-Box, indicating that its nucleotidyl transferase activity was complete and the antiviral effect depended on ribonuclease L (RNase L). OAS1b overexpression inhibited PRRSV replication, whereas small-interfering-RNA silencing of OAS1b resulted in increased virus titers. Additionally, OAS1b promoted expression of interferons as well as interferon-β promoter activity. These results lay the theoretical foundation for the development of new anti-PRRSV strategies.

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