TWIST1の異所性発現は、食道扁平上皮癌細胞株KYSE30の幹細胞マーカーOCT4をアップレギュレーションする

Ectopic expression of TWIST1 upregulates the stemness marker OCT4 in the esophageal squamous cell carcinoma cell line KYSE30.

• Mohammad Hossein Izadpanah
• Mohammad Reza Abbaszadegan
• Yasaman Fahim
• Mohammad Mahdi Forghanifard

抄録

背景:

転写因子TWIST1は、上皮間葉転換（EMT）過程や癌細胞の遊走、浸潤、転移に重要な役割を果たしている。また、ホメオボックス転写因子であるOCT4は、がん細胞の自己複製能に重要な役割を果たしています。本研究では、TWIST1の異所性発現が食道扁平上皮癌（ESCC）のOCT4遺伝子発現に与える影響を明らかにすることを目的としています。

Background: The transcription factor TWIST1 plays an important role in the epithelial-mesenchymal transition (EMT) process and in the migration, invasion and metastasis of cancer cells. OCT4, which is a homeobox transcription factor, has an important role in the self-renewal potential of cancer cells. Our aim here is to elucidate impact of ectopic expression of TWIST1 on OCT4 gene expression in esophageal squamous cell carcinoma (ESCC).

方法:

ＥＳＣＣ株はＫＹＳＥ３０であった。GP293T細胞をpurf-IRES-GFPおよびpGPプラスミドでトランスフェクトし、組換えウイルス粒子を作製した。正常な KYSE30 細胞と異所性発現細胞から mRNA 抽出と cDNA 合成を行った。の発現解析を相対比較リアルタイムPCR法で行った。

Methods: The ESCC line was KYSE30. GP293T cells were transfected with purf-IRES-GFP and pGP plasmids to produce recombinant viral particles. A semi-confluent KYSE30 culture was transduced with the prepared retroviral particles. mRNA extraction and cDNA synthesis were performed from normal KYSE30 cells and those ectopically expressing . Expressional analysis of and were performed with relative comparative real-time PCR.

結果:

in KYSE30 細胞の異所性発現は、その有意な過剰発現と関連していた：GFP-h KYSE-30 細胞では、対照の GFP 細胞よりもほぼ 9 倍高い。この発現誘導により、GFP-h KYSE-30 細胞では約 8 倍の有意な過剰発現が引き起こされた。インシリコ解析により、GFP-h KYSE-30細胞とGFP-h KYSE-30細胞の相関が予測された。

Results: Ectopic expression of in KYSE30 cells was related to its significant overexpression: nearly nine-fold higher in GFP-h KYSE-30 cells than in control GFP cells. This induced expression of caused significant upregulation of in GFP-h KYSE-30 cells: nearly eight-fold higher. In silico analysis predicted the correlation of and through .

結論:

OCT4 の過剰発現は癌幹細胞マーカーのアップレギュレーションと相関しており、TWIST1 は遺伝子発現を制御する重要な役割を果たしている可能性がある。OCT4 は自己複製過程に関与していることから、今回の結果は ESCC の細胞生物学との新たな関連性を示唆するものであり、自己複製誘導における TWIST1 の役割の可能性を強調している。

Conclusions: Overexpressed can be correlated with upregulation of the cancer stem cell marker and the protein may play critical regulatory role in gene expression. Since OCT4 is involved in the self-renewal process, the results may suggest a new linkage between and in the cell biology of ESCC, highlighting the probable role of TWIST1 in inducing self-renewal.