スペインの動物病院職員における培養、PCRおよび血清学的検査によるBartonella spp.の有病率

Prevalence of Bartonella spp. by culture, PCR and serology, in veterinary personnel from Spain.

• José A Oteo
• Ricardo Maggi
• Aránzazu Portillo
• Julie Bradley
• Lara García-Álvarez
• Montserrat San-Martín
• Xavier Roura
• Edward Breitschwerdt

抄録

背景:

Bartonella属は、主に節足動物によって感染し、哺乳類の貯水池に分布している節足動物の細胞内細菌である。人獣共通感染症の病因となるBartonella属菌が増加している。古典的なBartonella henselae、B. bacilliformisまたはB. quintanaの他に、他の種（B. elizabethae、B. rochalimae、B. vinsonii arupensisおよびB. v. berkhoffii、B. tamiaeまたはB. koehleraeなど）もまた、ヒトおよび/または動物の病気に関連している。これらの診断法（培養法、PCR法、血清学）は、通常、感度が低いのが現状である。2005年以降，Bartonella alphaproteobacteria growth medium（BAPGM）を用いたBartonella spp.のPCR増幅法が開発された．スペインのコンパニオンアニマル獣医師を対象に、培養、分子学的、血清学的にバルテロネラ感染症の有病率を評価することを目的とした。

BACKGROUND: The genus Bartonella includes fastidious, facultative intracellular bacteria mainly transmitted by arthropods and distributed among mammalian reservoirs. Bartonella spp. implicated as etiological agents of zoonoses are increasing. Apart from the classical Bartonella henselae, B. bacilliformis or B. quintana, other species (B. elizabethae, B. rochalimae, B. vinsonii arupensis and B. v. berkhoffii, B. tamiae or B. koehlerae, among others) have also been associated with human and/or animal diseases. Laboratory techniques for diagnosis (culture, PCR assays and serology) usually show lack of sensitivity. Since 2005, a method based on a liquid enrichment Bartonella alphaproteobacteria growth medium (BAPGM) followed by PCRs for the amplification of Bartonella spp. has been developed. We aimed to assess culture, molecular and serological prevalence of Bartonella infections in companion animal veterinary personnel from Spain.

方法:

89名の参加者のそれぞれがアンケートに記入した。B. vinsonii berkhoffii（遺伝子型I、IIおよびIII）、B. henselae、B. quintanaおよびB. koehleraeを抗原とした免疫蛍光アッセイ（IFA）を行った。血清反応性力価は、1:64のカットオフを選択した。血液サンプルをＢＡＰＧＭに接種し、血液寒天プレートに亜培養した。Bartonella spp.は、従来型および定量的リアルタイムPCRアッセイおよびDNAシークエンシングを用いて検出した。

METHODS: Each of 89 participants completed a questionnaire. Immunofluorescence assays (IFA) using B. vinsonii berkhoffii (genotypes I, II and III), B. henselae, B. quintana and B. koehlerae as antigens were performed. A cut-off of 1:64 was selected as a seroreactivity titer. Blood samples were inoculated into BAPGM and subcultured onto blood agar plates. Bartonella spp. was detected using conventional and quantitative real-time PCR assays and DNA sequencing.

結果:

6つのBartonella spp.または遺伝子型に対応する抗原のうち、最も低い血清反応性はB. quintana（11.2％）であり、最も高い血清反応性はB. v. berkhoffii遺伝子型III（56％）であった。89人のうち27％はいずれの検査抗原に対しても血清反応性を示さなかった。Bartonella spp. IFA の血清反応性は、いかなる臨床徴候や症状とも関連していなかった。B. henselae（n=2）、B. v. berkhoffii ジェノタイプI（n=1）およびIII（n=2）、B. quintana（n=2）を含むBartonella spp.のDNAが7/89人の獣医師から検出された。PCRおよびDNAシークエンシング所見は、臨床徴候や症状とは関連していなかった。共感染は観察されなかった。B. henselae PCR陽性者2名のうち1名は検査したすべての抗原に対してIFA血清陰性であったが、もう1名はB. henselae血清反応性ではなかった。残りのPCR陽性者は、複数のBartonella spp.抗原に対して血清反応性であった。

RESULTS: Among antigens corresponding to six Bartonella spp. or genotypes, the lowest seroreactivity was found against B. quintana (11.2%) and the highest, against B. v. berkhoffii genotype III (56%). A total of 27% of 89 individuals were not seroreactive to any test antigen. Bartonella spp. IFA seroreactivity was not associated with any clinical sign or symptom. DNA from Bartonella spp., including B. henselae (n = 2), B. v. berkhoffii genotypes I (n = 1) and III (n = 2), and B. quintana (n = 2) was detected in 7/89 veterinary personnel. PCR and DNA sequencing findings were not associated with clinical signs or symptoms. No co-infections were observed. One of the two B. henselae PCR-positive individuals was IFA seronegative to all tested antigens whereas the other one was not B. henselae seroreactive. The remaining PCR-positive individuals were seroreactive to multiple Bartonella spp. antigens.

結論:

Bartonella spp.への曝露または感染の血清学的および分子学的有病率がスペインのコンパニオンアニマル獣医師を対象に高かった。臨床症状を伴わないBartonella PCR陽性者の所見を明らかにするためには、BAPGM濃縮血液培養およびPCRを用いたさらなる研究が必要である。

CONCLUSIONS: High serological and molecular prevalences of exposure to, or infection with, Bartonella spp. were found in companion animal veterinary personnel from Spain. More studies using BAPGM enrichment blood culture and PCR are needed to clarify the finding of Bartonella PCR-positive individuals lacking clinical symptoms.