Tリンパ球増殖におけるプロテインキナーゼCの役割。プロテインキナーゼC依存性経路と非依存性経路の存在

The role of protein kinase C in T lymphocyte proliferation. Existence of protein kinase C-dependent and -independent pathways.

• J M Redondo
• A López-Rivas
• V Vila
• E J Cragoe
• M Fresno

抄録

マウス細胞傷害性Ｔ細胞クローン（ＣＴＬＬ-２）は、トランスフェリン、２-メルカプトエタノール、および組換えインターロイキン２（ＩＬ-２）のみを補充した培地の存在下で増殖することができた。このリンパホカインは、これらの細胞におけるＤＮＡの合成を刺激した。同様に、プロテインキナーゼＣを活性化するホルボルエステルは、このクローンにおいてＤＮＡ合成を誘導した。さらに、この後の増殖は、ＩＬ-２誘導増殖を阻害する抗ＩＬ-２受容体抗体によって阻害されず、このことは、細胞によるＩＬ-２の分泌に間接的に起因するものではないことを示唆している。高用量のフォルボルエステルで４８時間前処理したＣＴＬＬ-２細胞は、プロテインキナーゼＣをダウンレギュレートし、この酵素を枯渇させた。これは以下の方法で示された。1）プロテインキナーゼCの精製とin vitroアッセイ、2）プロテインキナーゼCの活性化に直接リンクされているNa+/H+抗ポーターの刺激におけるホルボル酸エステルの効果の欠如、予想通り、プロテインキナーゼC枯渇細胞は、もはやDNAを合成せず、ホルボル酸エステルに応答して増殖した。しかし、IL-2に反応した細胞はコントロール細胞と同じように増殖した。したがって、我々の結果は、T細胞の増殖には、プロテインキナーゼCが関与する経路と関与しない経路の2つの異なる経路があることを示唆している。

The mouse cytotoxic T cell clone (CTLL-2) was able to grow in the presence of culture medium supplemented only with transferrin, 2-mercaptoethanol, and recombinant interleukin 2 (IL-2). This lymphokine stimulated the synthesis of DNA in these cells. Similarly, phorbol esters, which activate protein kinase C, induced DNA synthesis in this clone. Furthermore, this later proliferation was not blocked by anti-IL-2 receptor antibodies, which inhibited IL-2-induced proliferation, suggesting that it was not indirectly due to the secretion of IL-2 by the cells. CTLL-2 cells pretreated with high doses of phorbol esters for 48 h down regulated protein kinase C and were depleted of this enzyme. This was shown by: 1) purification and in vitro assay of protein kinase C; 2) the lack of effect of phorbol esters in the stimulation of the Na+/H+ anti-porter which has been directly linked to the activation of protein kinase C. As expected, those protein kinase C-depleted cells no longer synthesized DNA and proliferated in response to phorbol esters. However, they proliferated identically to control cells in response to IL-2. Therefore, our results suggest two different pathways for T cell proliferation, one which involves protein kinase C and the other which does not.