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Schwanniomyces occidentalisのα-アミラーゼ遺伝子とその遺伝子産物の分泌量の解析
Analysis of the alpha-amylase gene of Schwanniomyces occidentalis and the secretion of its gene product in transformants of different yeast genera.
PMID: 2806251 DOI: 10.1111/j.1432-1033.1989.tb15069.x.
抄録
酵母Schwanniomyces occidentalisのα-アミラーゼ遺伝子（AMY1）をクローニングし、その特徴を明らかにした。S. occidentalis DNA のコスミド遺伝子ライブラリーを Saccharomyces cerevisiae でα-アミラーゼ分泌のスクリーニングを行った。ポジティブクローンには、512-アミノ酸ポリペプチドをコードする1536ヌクレオチドのオープンリーディングフレームを持つDNA断片が含まれており、Mrは56,500であった。推論されたアミノ酸配列は、Saccharomycopsis fibuligeraやAspergillus oryzaeのα-アミラーゼの配列と有意な類似性を明らかにした。AMY遺伝子は、S. cerevisiae、Kluyveromyces lactis、Schizo-saccharomyces pombeにおいて、元々のプロモーターから発現していることが明らかになった。
We have cloned and characterized the alpha-amylase gene (AMY1) of the yeast Schwanniomyces occidentalis. A cosmid gene library of S. occidentalis DNA was screened in Saccharomyces cerevisiae for alpha-amylase secretion. The positive clone contained a DNA fragment harbouring an open reading frame of 1536 nucleotides coding for a 512-amino-acid polypeptide with a calculated Mr of 56,500. The deduced amino acid sequence reveals significant similarity to the sequence of the Saccharomycopsis fibuligera and Aspergillus oryzae alpha-amylases. The AMY l gene was found to be expressed from its original promoter in S. cerevisiae, Kluyveromyces lactis and Schizo-saccharomyces pombe leading to an active secreted gene product and thus enabling the different yeast transformants to grow on starch as a sole carbon source.