パラコート誘発性急性肺障害ラットにおける肺サーファクタントの発現

[Expression of the pulmonary surfactant in rat with paraquat-induced acute lung injury].

• Dongfeng Pan
• Shisong Liang
• Hongyan Xiao
• Kele Qi
• Jing Ma
• Shuyao Su
• Liyun Ma

抄録

目的:

パラコート誘発性急性肺障害ラットにおける肺サーファクタントの発現を調べる。

OBJECTIVE: To explore the expression of pulmonary surfactant in rats with paraquat-induced acute lung injury.

方法:

合計36匹のSDラットを、6、12、24、48、72時間の5つの時間点で無作為にコントロール群（n=6）とパラコート群に分け、各時間点6匹ずつ投与した。全てのラットにパラコート（８０ｍｇ／ｋｇ）を１回注射した。対照群ではパラコート中毒後0時間（瞬間）に、パラコート各時間点群では対応する時点で検体を採取した。肺組織の病理変化をHE染色で観察し、マロンジアルデヒド（MDA）レベルの検出にはチオバルビツール酸法を用い、気管支肺胞ラバージ液（BALF）中の界面活性タンパク質（SP）-AおよびSP-Dの時間経過に伴う相対発現をウエスタンブロット法で解析した。

METHODS: A total of 36 SD rats were randomly divided into the control group (n=6) and paraquat group at 6, 12, 24, 48, 72 h five time points, each time points 6 rats. All of the rats were injected with paraquat (80 mg/kg) for once. The specimens were collected at 0 h (instant) after paraquat intoxication in the control group, and at the corresponding point in time in the paraquat each time point groups. The pathology changes of lung tissue were observed by HE staining, thiobarbituric acid method was used to detect malondialdehyde (MDA) level, and Western blot method was used to analyze the relative expression of surfactant protein (SP)-A and SP-D in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) with time.

結果:

コントロールと比較して、BALFにおけるMDAのレベルは、パラコート中毒後6、24、48時間で有意に高く（（4.19 ± 0.12）、（3.33 ± 0.08）、（3.52 ± 0.08）対（2.82 ± 0.15）nmol/mg、すべてP<0.01）、12、72時間では有意差なし（2.76 &#xB1; 0.13、（2.79 &#xB1; 0.10）nmol/mg、いずれもP&gt;0.05）、BALFにおけるSP-Aの相対的な発現量は、対照と比較して有意に高くなった。ｎｍｏｌ／ｍｇ、いずれもＰ＞0.05）；ＢＡＬＦにおけるＳＰ-Ａの相対発現は、パラコート中毒後６時間で有意に高かった（１．32 ± 0.19 vs 1.00 ± 0.19、P<0.01）で有意に高く、24、48時間で低く（0.43 ± 0.07、0.67 ± 0.08、ともにP<0.01）、BALFにおけるSP-Aの相対発現は、パラコート中毒後6時間で有意に高く（1.32 ± 0.19 vs 1.00 ± 0.19、P<0.01）、24、48時間で低く（0.43 ± 0.07、0.67 ± 0.08、ともにP<0.01）、BALFにおけるSP-Aの相対発現は、パラコート中毒後6時間で有意に高く（1.32 ± 0.19 vs 1.00 ± 0.19、P<0.01）、24、48時間で低く（0.43 ± 0.07、0.67 ± 0.08、ともにP<0.01）、12, 72 時間では有意差なし（0.98 ± 0.15, 0.79 ± 0.18, いずれも P>0.05）；BALF における SP-D の相対発現は、パラコート中毒後 6, 12 時間で有意に高く（1.54 ± 0.33, 1.64 ± 0.37 vs 1.00 ± 0.23, いずれも P<0.01）、24 時間では有意差なし（0.43 &#xB1; 0.07, 0.67 &#xB1; 0.08, いずれも P&lt;0.01）、12, 72 時間では有意差なし（0.98 ± 0.15, 0.79 ± 0.18, いずれも P>0.05）。また、MDA、SP-A、SP-Dの発現は、最初に増加し、その後減少し、最終的に増加するという変動状態を特徴としていた。

RESULTS: As compared to control, the levels of MDA in BALF were significantly higher at 6, 24, 48 h after paraquat intoxication ((4.19 ± 0.12), (3.33 ± 0.08), (3.52 ± 0.08) vs (2.82 ± 0.15) nmol/mg, all P<0.01), no significantly different at 12, 72 h ((2.76 ± 0.13), (2.79 ± 0.10) nmol/mg, both P>0.05); the relative expression of SP-A in BALF were significantly higher at 6 h after paraquat intoxication (1.32 ± 0.19 vs 1.00 ± 0.19, P<0.01), lower at 24, 48 h (0.43 ± 0.07, 0.67 ± 0.08, both P<0.01), and no significantly different at 12, 72 h (0.98 ± 0.15, 0.79 ± 0.18, both P>0.05); the relative expression of SP-D in BALF were significantly higher at 6, 12 h after paraquat intoxication (1.54 ± 0.33, 1.64 ± 0.37 vs 1.00 ± 0.23, both P<0.01), no significantly different at 24, 48 h (1.07 ± 0.19, 0.97 ± 0.15, both P>0.05), and reached the peak at 72 h (2.15 ± 0.26, P<0.01); the expression of MDA, SP-A and SP-D were characterized by the state of fluctuation with increased first, reduced after, and finally increased.

結論:

ラットにおけるパラコート誘発急性肺障害の初期段階でSP-A, SP-Dの発現が増加しており、肺障害の程度を反映していると考えられる。

CONCLUSION: The expression of SP-A, SP-D increase at the early stage of the paraquat-induced acute lung injury in rat, which can reflect the degree of lung injury.