CCAAT/エンハンサー結合タンパク質ベータは、ヒト単球細胞におけるインターフェロン-ガンマ誘導性p48 (ISGF3-ガンマ)遺伝子転写を媒介する

CCAAT/enhancer-binding protein beta mediates interferon-gamma-induced p48 (ISGF3-gamma ) gene transcription in human monocytic cells.

• W Xiao
• L Wang
• X Yang
• T Chen
• D Hodge
• P F Johnson
• W Farrar

抄録

これまでの研究では、インターフェロン（ＩＦＮ）による刺激に応答して新規な転写因子に結合するインターフェロン刺激応答エレメント様エレメント（γ-インターフェロン活性化転写エレメントと呼ばれる）が、インターフェロン刺激遺伝子因子-３γ（ｐ４８）プロモーター領域内に存在することが確認されている（Ｗｉｅｈｕｈａ，Ｘ，Ｋｏｌｌｌａ，Ｖ，およびＫａｌｖａｋｏｌａｎｕ，Ｄ．Natl. Acad.Sci. U.S.A. 94, 103-108）。)本研究では、ヒトモノファージ由来のｃＤＮＡライブラリーを酵母ワンハイブリッド系でスクリーニングすることにより、γ-インターフェロン活性化転写因子コグナート転写因子の一つとしてＣＣＡＡＡＴ／エンハンサー結合タンパク質β（Ｃ／ＥＢＰ-β）を同定し、これを用いて、ヒトモノファージ由来のｃＤＮＡライブラリーを酵母ワンハイブリッド系でスクリーニングすることにより、γ-インターフェロン活性化転写因子コグナート転写因子の一つとしてＣＣＡＡＡＴ／エンハンサー結合タンパク質β（Ｃ／ＥＢＰ-β）を同定した。電気泳動移動度シフトアッセイの研究から、C/EBP-βは、そのヘテロ二量化パートナーの変化を受けることにより、IFN-γ刺激時にp48遺伝子発現を動的に制御することが示唆された。一過性のトランスフェクション研究は、C/EBP-βの過剰発現がp48プロモーターからのIFN-γ誘導転写を強く増強することを示している。しかし、N末端トランザクティベーションドメインを欠くC/EBP-βの欠失変異体は、p48プロモーターを刺激することができなかった。ウェスタンブロットにより、C/EBP-βはTHP-1由来のマクロファージにおいてIFN-γ刺激により誘導されることが明らかになった。これらの結果をまとめると、C/EBP-βは、IFNシグナル伝達経路の必須成分であるp48遺伝子発現の転写調節により、ヒトIFN-γシグナル伝達経路において重要な役割を果たしていることが示唆された。

Previous studies have identified a novel interferon-stimulated response element-like element, termed gamma-interferon-activating transcription element, within the interferon-stimulating gene factor-3gamma (p48) promoter region that is bound by novel transcription factors in response to stimulation with interferons (IFNs) (Weihua, X., Kolla, V., and Kalvakolanu, D. V. (1997) Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 94, 103-108). In the present study, we have identified CCAAT/enhancer-binding protein beta (C/EBP-beta) as one of the gamma-interferon-activating transcription element cognate transcription factors by screening a human monophage-derived cDNA library in a yeast one-hybrid system. Electrophoretic mobility shift assay studies suggest that C/EBP-beta dynamically regulates p48 gene expression upon IFN-gamma stimulation by undergoing changes in its heterodimerization partners. Transient transfection studies demonstrate that overexpression of C/EBP-beta strongly enhanced IFN-gamma-induced transcription from the p48 promoter. However, deletion mutants of C/EBP-beta that lack the N-terminal transactivation domain were unable to stimulate the p48 promoter. Western blotting revealed that C/EBP-beta is induced by IFN-gamma stimulation in THP-1-derived macrophages. Collectively, these results suggest that C/EBP-beta plays an important role in the human IFN-gamma signaling pathway by transcriptional regulation of p48 gene expression, an essential component in the IFN signaling pathway.