う蝕および歯肉炎に関連する細菌およびバイオフィルムに対するマヌカハニー／プロポリス歯磨剤のin-vitro効果

In-Vitro Effect of Manuka Honey / Propolis Toothpastes on Bacteria and Biofilm Associated with Caries and Gingivitis.

抄録

目的:

プロポリス（マヌカプロップ）またはフッ化物（マヌカF）を含む2種類のマヌカハニー配合歯磨剤の口腔内細菌およびバイオフィルムに対する抗菌および抗バイオフィルム効果を、歯磨剤ベース（TP con）および市販歯磨剤（TP com）と比較して検討すること。

PURPOSE: To investigate the antibacterial and anti-biofilm effects of two Manuka honey toothpaste formulations containing propolis (Manuka prop) or fluoride (Manuka F), in comparison with the toothpaste base (TP con) and a commercial toothpaste (TP com), on oral bacteria and biofilm.

材料と方法:

口腔内細菌5種に対する製剤およびコントロールの最小発育阻止濃度（MIC）を試験した。3.5日間前培養した多種の歯科用バイオフィルムに対する影響と、24時間までのデノボバイオフィルム形成の阻害の両方を調査した。20％、10％、5％の濃度の被験物質を、あらかじめ形成されたバイオフィルムに1分間塗布した。コロニー形成単位（cfu）、代謝活性、バイオフィルム質量の減少を測定した。同様に、細菌と培地を加える前に、試験物質を30分間表面に塗布した。歯肉線維芽細胞に対する細胞毒性を評価するために、テトラゾリウム色素の減少（MTTアッセイ）を用いた。

MATERIALS AND METHODS: The minimum inhibitory concentration (MIC) of the formulations and controls were tested against five oral bacterial species. Both the effect on a multispecies dental biofilm precultured for 3.5 days as well as the inhibition of de-novo biofilm formation up to 24 h were investigated. Test substances at concentrations of 20%, 10% and 5% were applied to preformed biofilm for 1 min. The reduction in colony-forming units (cfu), metabolic activity, and biofilm mass were determined. Similarly, the test substances were applied to surfaces for 30 min before bacteria and media were added. The reduction of a tetrazolium dye (MTT assay) was used to assess cytotoxicity on gingival fibroblasts.

結果:

TP conを含むすべての歯磨き製剤のMIC値は非常に低く、最も高いMIC値は0.04%であった。前培養したバイオフィルムでは、いずれの歯磨剤を添加してもコロニー形成単位（cfu）数と代謝活性の両方が低下した。cfuが最も減少したのは、20%のTP com添加後（約6 log10）と20%のマヌカプロップ添加後（約2.3 log10）であった。しかし、バイオフィルム量は減少しなかった。歯磨き製剤で表面をコーティングすると、新たに形成されたバイオフィルム中のcfuは濃度依存的に減少し、TP comが最も活性が高かった。歯磨き製剤は濃度依存的に歯肉線維芽細胞の生存率に影響を及ぼしたが、製剤間に差は認められなかった。

RESULTS: The MIC values of all toothpaste formulations including TP con were very low with the highest MIC of 0.04%. In precultured biofilms, both the number of colony forming units (cfu) and metabolic activity decreased following addition of any toothpaste. The greatest reductions of cfu were found after addition of 20% TP com (by about 6 log10) and after 20% Manuka prop (by about 2.3 log10). However, the biofilm mass was not reduced. Coating the surface with toothpaste formulation, the cfu in the newly formed biofilm decreased in a concentration-dependent manner, with TP com being most active. Both 20% of Manuka prop and Manuka F reduced the cfu counts more than the TP con at 24 h. The toothpaste formulations affected the viability of gingival fibroblasts in a concentration-dependent manner, with no differences observed among the formulations.

結論:

マヌカハニー配合歯磨剤は、従来の化学薬剤を配合した歯磨剤の代替品となる可能性がある。う蝕および歯肉炎の予防効果を臨床的に検討するためには、さらなる研究が必要である。

CONCLUSION: The Manuka-honey containing toothpastes might be an alternative to toothpaste containing conventional chemical agents. Further research is needed to clinically examine the effect on caries and gingivitis prevention.