初代歯肉細胞を用いた3D歯肉in vitroモデルの開発

Development of 3D gingival in vitro models using primary gingival cells.

抄録

2013年3月以降、欧州では化粧品成分の毒性評価のための動物実験が禁止されている。この指令は、口腔成分を含むすべてのパーソナルケア成分に適用される。歯肉in vitro 3Dモデルは市販されています。しかし、口腔疾患の研究、成分の毒性の測定、生体適合性の試験、化粧品成分のさまざまな処方の評価を行うためには、いくつかのパラメーターを調整できる「インハウスモデル」を開発することが不可欠です。私たちの組織工学の専門知識により、正常なヒト歯肉細胞（線維芽細胞およびケラチノサイト）からヒト口腔組織を再構築することができました。実際、これらの歯肉細胞を培養するために、手術残渣からの分離が行われました。これらの細胞は内因性の増殖能力を維持しており、生体組織に近い同等の組織を再建することができる。初代歯肉細胞を用いた歯肉上皮、絨毛相当組織、およびこれら2つの組織の組み合わせ（全層）の再建は、in vivo歯肉モデルのすべての特徴を示した。

Since March 2013, animal testing for toxicity evaluation of cosmetic ingredients is banned in Europe. This directive applies to all personal care ingredients including oral ingredients. Gingival in vitro 3D models are commercially available. However, it is essential to develop "in house model" to modulate several parameters to study oral diseases, determine the toxicity of ingredients, test biocompatibility, and evaluate different formulations of cosmetic ingredients. Our expertise in tissue engineering allowed us to reconstruct human oral tissues from normal human gingival cells (fibroblasts and keratinocytes). Indeed, isolation from surgical leftover was performed to culture these gingival cells. These cells keep their endogenous capacity to proliferate allowing reconstruction of equivalent tissue close to in vivo tissue. Reconstruction of gingival epithelium, chorion equivalent, and the combination of these two tissues (full thickness) using primary gingival cells displayed all characteristics of an in vivo gingival model.