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ヒト歯髄由来細胞株の特性評価
Characterization of human dental pulp-derived cell lines.
PMID: 18479370 DOI: 10.1111/j.1365-2591.2008.01409.x.
抄録
エイム:
歯髄組織由来の異なるタイプの線維芽細胞株を確立し、特徴づけること。
AIM: To establish and characterize different types of fibroblastic cell lines derived from dental pulp tissue.
ＭＥＴＨＯＤＯＬＯＧＹ:
ヒト歯髄組織由来細胞をリポフェクタミントランスフェクション法によりSV40ラージT抗原をトランスフェクションした。Geneticin (G418)耐性細胞を選択し、制限希釈法により異なる細胞株を樹立した。細胞の系統を特徴付けるために、各クローンを抗線維芽細胞抗体、抗ビメンチン抗体、抗コラーゲンI型抗体、III型抗体で免疫蛍光染色した。Total RNAを各クローンから抽出し、差動表示実験を行った。
METHODOLOGY: Human dental pulp tissue-derived cells were transfected with SV40 large T antigen by Lipofectamine transfection method. Geneticin (G418)-resistant cells were selected and different cell lines were established by a limiting dilution method. To characterize the lineages of cells, each clone was immunofluorescently stained by anti-fibroblast, anti-vimentin, anti-collagen type I and type III antibodies. Total RNA was extracted from each clone and subjected to a differential display experiment.
結果:
SV40ラージT抗原をトランスフェクションすることにより、9種類の細胞クローンが得られた。これらの細胞クローンはすべて、抗線維芽細胞抗体、抗ビメンチン抗体、抗コラーゲンI型およびIII型抗体で陽性に染色されていた。ディファレンシャルディスプレイ実験により、各細胞クローン間で発現量が異なる８種類の遺伝子を検出した。配列決定とデータベース検索の結果、1つの遺伝子がT細胞マーカーThy-1と同一であることが明らかになった。歯髄組織におけるThy-1の発現は、免疫組織化学染色により確認された。
RESULTS: By transfecting SV40 large T antigen, nine different cell clones were obtained. All these cell clones were positively stained by anti-fibroblast, anti-vimentin, anti-collagen type I and type III antibodies. With differential display experiment, eight different genes, the expression levels of these genes were varied amongst each cell clone, were detected. After sequencing and database search, one gene was revealed to be identical to T-cell marker, Thy-1. Thy-1 expression in dental pulp tissue was confirmed by immunohistochemical staining.
結論:
ヒト歯髄組織由来の線維芽細胞株は、異なる遺伝子発現プロファイルを有しており、サブ集団の存在を示唆している。
CONCLUSION: Fibroblastic cell lines derived from human dental pulp tissue possessed different gene expression profiles suggesting the existence of subpopulations.