小児急性骨髄性白血病における長鎖非コードRNA linc00467の発現と薬剤耐性への役割

[Expression of long non-coding RNA linc00467 in childhood acute myeloid leukemia and its role in drug resistance].

• Chun-Bao Rao
• Dong Luo
• Zi-Tian Lin
• Ming-Yu Xie
• Yuan Hu
• Qi Peng
• Hua Jiang
• Zhen-Hong Zhang
• Xiao-Mei Lu

抄録

目的:

小児急性骨髄性白血病（AML）におけるロングノンコーディングRNA linc00467の発現と機能を調べる。

OBJECTIVE: To study the expression and function of long non-coding RNA linc00467 in childhood acute myeloid leukemia (AML).

方法:

2016年5月から2018年6月までに診断されたAML患者5名の小児から骨髄サンプルを採取した。骨髄検査に基づく正常骨髄サンプルをコントロールとして 3 名の小児から収集した。2 群の linc00467 の発現を測定するために定量的リアルタイム PCR を用いた。AML細胞（HL-60）においてlinc00467の過剰発現を達成するためにレンチウイルスシステムを使用し（linc00467過剰発現群）、緑色蛍光タンパク質（GFP）を発現する空ベクターをAML細胞にトランスフェクションし、GFP対照群を確立した。レンチウイルスシステムを用いてAML細胞に干渉配列を挿入し（sh-linc00467干渉群）、ランダム配列を挿入してsh-NC対照群を樹立した。細胞増殖とドキソルビシンに対する抵抗性が全群で観察された。

METHODS: Bone marrow samples were collected from 5 children with AML who were diagnosed from May 2016 to June 2018. Normal bone marrow samples based on bone marrow examination were collected from 3 children as controls. Quantitative real-time PCR was used to measure the expression of linc00467 in the two groups. A lentivirus system was used to achieve overexpression of linc00467 in AML cells (HL-60) (linc00467 overexpression group), and empty vector expressing green fluorescent protein (GFP) was transfected into AML cells to establish a GFP control group. A lentivirus system was used to insert an interfering sequence into AML cells (sh-linc00467 interfering group), and a random sequence was inserted to establish an sh-NC control group. Cell proliferation and resistance to doxorubicin were observed for all groups.

結果:

正常対照群と比較して、AML患児ではlinc00467が有意に増加していた（P=0.018）。linc00467の過剰発現および発現干渉は、細胞増殖に有意な影響を及ぼさなかった。linc00467過剰発現群は、GFP対照群と比較して、アドリアマイシン濃度0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μg/mLでHL-60細胞の生存率が有意に上昇した（P＜0.05）。sh-NC対照群と比較して、sh-linc00467干渉群では、アドリアマイシン濃度0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μg/mLでHL-60細胞の生存率が有意に低下した(P<0.05)。アドリアマイシン投与群では、未投与群と比較して、HL-60細胞におけるlinc00467の発現が有意に増加した（P<0.05）。

RESULTS: Compared with the normal control group, the children with AML had a significant increase in linc00467 (P=0.018). Overexpression and interference with linc00467 expression had no significant effect on cell proliferation. Compared with the GFP control group, the linc00467 overexpression group had a significant increase in the viability of HL-60 cells at the adriamycin concentrations of 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, and 0.5 μg/mL (P<0.05). Compared with the sh-NC control group, the sh-linc00467 interfering group had a significant reduction in the viability of HL-60 cells at the adriamycin concentrations of 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, and 0.5 μg/mL (P<0.05). Compared with the untreated group, the adriamycin treatment group had a significant increase in the expression of linc00467 in HL-60 cells (P<0.05).

結論:

本研究では、急性骨髄性白血病におけるアドリアマイシンに対する耐性を促進するlinc00467の生物学的機能を明らかにし、急性骨髄性白血病の新規治療薬開発の基礎を築くことができました。

CONCLUSIONS: This study reveals the biological function of linc00467 to promote the resistance to adriamycin in AML, which provides a basis for developing new therapeutic drugs for AML.