溶解性と腸管透過性を改善するためのマイクロエマルジョン中の未熟オリーブ（L. ）からのフェノールリッチ抽出物の製剤化

Formulation of a Phenol-Rich Extract from Unripe Olives ( L.) in Microemulsion to Improve Its Solubility and Intestinal Permeability.

• Lorenzo Cecchi
• Vieri Piazzini
• Mario D'Ambrosio
• Cristina Luceri
• Federica Rocco
• Marzia Innocenti
• Giulia Vanti
• Nadia Mulinacci
• Maria Camilla Bergonzi

抄録

L.からのフェノール化合物の有益な特性はよく知られている。未熟なオリーブ(Moraiolo cultivar)からオリーブエキス(OE)を調製した。本研究の目的は、OEをマイクロエマルジョン（ME）にして経口投与することである。オリーブからOEをEtOH:HO(80:20)で抽出し、HPLC-DADで特徴付けした。MEの組成は、溶解度と疑似タレント図によって記載された。ＭＥを化学的および物理的に特徴付け、４℃での安定性を３ヶ月間分析した。ＯＥの溶解性および腸管透過性を改善する製剤の能力を、パラレル人工膜透過性アッセイ（ＰＡＭＰＡ）アッセイおよびＣａｃｏ-２細胞によって評価した。抽出物の全フェノール含量は39% /であり、主成分はオレウロペイン(31.0%)であり、リグストロシド(3.1%)およびバーバスクシド(2.4%)とともに含有されていた。油性相としてCapryol 90を用い、界面活性剤および共界面活性剤としてそれぞれCremophor ELおよびTranscutol(2:1)を用いてMEを調製した。MEの液滴サイズは14.03±1.36nm、PdI 0.20±0.08、ζ電位-1.16±0.48であった。MEの安定性は、少なくとも3ヶ月間確認された。製剤には、35 mg/mLのOEを担持し、抽出物の溶解度を約4倍に増加させた。OEの増強された透過性をPAMPAで評価し、Pe値（OEハイドロアルコール溶液では1.44±0.83×10cm/s、OE-MEでは3.74±0.34×10cm/s）で示された。Caco-2細胞の輸送試験でも同様の結果が確認された。P は OE 溶液で 16.14±0.05×10cm/s、OE-ME で 26.99±0.45×10cm/s であった。MEは経口投与に適した製剤であることが証明された。

The beneficial properties of phenolic compounds from L. are well-known. An olive extract (OE) was prepared from unripe olives (Moraiolo cultivar). The study aimed to formulate OE into a microemulsion (ME) in oral dosage form. OE was extracted from olives with EtOH:HO (80:20) and characterized by HPLC-DAD. ME composition was stated by a solubility and pseudo-ternary diagram. The ME was chemically and physically characterized, and its stability at 4 °C was analyzed for three months. The ability of the formulation to ameliorate the solubility and the intestinal permeability of OE was evaluated by a Parallel Artificial Membrane Permeability Assay (PAMPA) assay and Caco-2 cells. The total phenolic content of the extract was 39% /. The main constituent was oleuropein (31.0%), together with ligstroside (3.1%) and verbascoside (2.4%). The ME was prepared using Capryol 90 as the oily phase, and Cremophor EL and Transcutol (2:1) as surfactant and co-surfactant, respectively. ME droplet size was 14.03 ± 1.36 nm, PdI 0.20 ± 0.08, ζ-potential -1.16 ± 0.48. Stability of ME was confirmed for at least three months. The formulation was loaded with 35 mg/mL of OE, increasing the solubility of the extract by about four times. The enhanced permeability of OE was evaluated by PAMPA, as demonstrated by the Pe value (1.44 ± 0.83 × 10 cm/s for OE hydroalcoholic solution, 3.74 ± 0.34 × 10 cm/s for OE-ME). Caco-2 cell transport studies confirmed the same results: P was 16.14 ± 0.05 × 10 cm/s for OE solution and 26.99 ± 0.45 × 10 cm/s for OE-ME. ME proved to be a suitable formulation for oral delivery.