ラット血漿中のMarsdenia tenacissima抽出物に含まれる8つの生理活性成分をLC-MS/MSで同時測定し、薬物動態試験に応用した

Simultaneous determination of eight bioactive components in Marsdenia tenacissima extract in rat plasma by LC-MS/MS and its application in a pharmacokinetic study.

• SiYu Li
• WenHan Pei
• Hui Zhang

抄録

伝統的な漢方薬（TCM）として、Marsdenia tenacissima (Roxb.) Wight et Arn.は、悪性腫瘍、白血球症、膀胱炎、喘息などの治療に特異的な効果を発揮することから、臨床現場では欠かせない役割を果たしている。本研究では、ラット血漿サンプル中のM. tenacissima抽出物からテナシソシドB,H,G,I、カフェ酸、クリプトクロロゲン酸、クロロゲン酸、ネオクロロゲン酸を同時に測定するための新規かつ科学的なLC-MS/MSアプローチを確立することを目的とした。内部標準物質としてジゴキシンを使用した。移動相Aには水（0.1%ギ酸を含む）を使用し、移動相Bにはアセトニトリルを用いてグラジエント溶出を行った。これらのUPLC法は、検量線、精度、精度、安定性、回収率など、バイオ医薬品分析に必要な要件を満たしていることが確認されました。さらに、M. tenacissima抽出物をラットに投与した際の薬物動態を総合的に調査したところ、この方法が有効であることが確認された。薬物動態パラメータによると、テナシソシドB,I,H,GはM. tenacissima抽出物中の長時間作用型の主要な生理活性成分であり、平均滞留時間が長く、高濃度であった。これらの結果は、M. tenacissimaの吸収メカニズムを明らかにし、臨床応用のための重要な情報を提供するものであった。

As a traditional Chinese medicine (TCM), Marsdenia tenacissima (Roxb.) Wight et Arn. plays an indispensable role in clinical practice due to its specific efficacy in treating malignant tumors, leukocythemia, cystitis and asthma. This study aimed to establish a novel and scientific LC-MS/MS approach to simultaneously determine tenacissoside B,H,G,I, caffeic acid, cryptochlorogenic acid, chlorogenic acid, and neochlorogenic acid from M. tenacissima extract within the rat plasma samples. Digoxin was used as the internal reference. All determinations were carried out using the Eclipse Plus C18 column, and water (containing 0.1% formic acid) was used as the mobile phase A, while acetonitrile as the mobile phase B for gradient elution. The UPLC methods, including calibration curves, accuracy, precision, stability and recovery of the total eight analytes were validated in accordance with the requirements for biopharmaceutical analysis. Moreover, the as-proposed approach was also used in the comprehensive pharmacokinetic research on those eight analytes within rats following M. tenacissima extract gavage. According to the pharmacokinetic parameters, tenacissoside B,I,H and G were the long-acting and primary bioactive constituents in M. tenacissima extract, which had long mean residence times and great concentrations. Our findings shed light on the absorption mechanism and provided significant information for the clinical application of M. tenacissima.

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